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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » C18柱压过高。。。
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ainim

金虫 (小有名气)

[求助] C18柱压过高。。。

求助各位亲，用watersC18柱，常温检测，流动相是20%乙腈80%磷酸缓冲液，1ml/min，前几次做的时候还好，这次做的柱压一下子高了起来，都超过设定上限4000psi了，以前只有1700psi左右，我先用纯甲醇冲0.5ml/min，压力下降到600psi，换成50%甲醇50%纯水，结果半个多小时后柱压又到2000多了（1ml/min则为4000多），换了纯水源再试结果还是这样，再换成纯甲醇一会儿压力又下降到600，如此循环。。。（开始怀疑是水的问题，换了两次水源，每次都用有机膜抽滤两次，结果还是不行）求救哇求救哇。。。

[ Last edited by ainim on 2013-4-25 at 14:36 ]
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刘涛...
1楼 2013-04-25 14:34:40
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ainim

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by swallow13 at 2013-04-26 11:42:13
晕 5%硝酸冲柱子 你柱子不想要了吗？lz 你之前走的是什么样品？显然是有杂质堵柱子了 如果纯甲醇纯乙腈冲洗没用的话 可以尝试用DMF或者DMSO低流速来洗一下柱子 主要还是要根据样品种类来选择对应的洗涤剂 比如蛋白样 ...

我木有用稀硝酸冲柱子，那是前面的亲建议的...我之前走的是有机酸，用的磷酸缓冲盐溶液，现在好了 虽然柱压还没降到以前的水平 但是已经可以用了 谢谢你啦~
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刘涛...
20楼2013-05-08 09:37:00
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是柱子被堵住了？
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-25 15:01:48
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小豆芽

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
重新蒸水，用水膜过滤，流速调小些，洗的时间长些。
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3楼2013-04-25 15:12:11
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sdzktd

木虫 (正式写手)

美丽家族三当家

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
听不到: 金币+2, 感谢您的解答，欢迎常来分析版 2013-04-25 21:31:10
ainim: 金币+3 2013-04-26 11:06:40
首先HPLC用水要过滤，再就是你循环的方法就不对啊，用缓冲盐做完样后要用15%乙腈冲洗柱子，如果你用缓冲盐流动相做样一天，最好小流速冲过夜,把柱内的缓冲盐都要冲洗出来，才能换有机相冲,完了要有机相保存。
赞一下(2人) 回复此楼
belivemesuccess!!
4楼2013-04-25 15:38:36
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查看全部 27 个回答
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