24小时热门版块排行榜    

查看: 1729  |  回复: 5

mengyouren

铜虫 (著名写手)

[求助] 带有GFP的E.coli BL21经IPTG诱导后菌体程绿色

请教高人,我将GFP基因连接在pET22(b)上,转化到E.coli BL21中,经IPTG诱导表达,我用紫外灯照了几下,也不确定是有绿色荧光,还是培养基在紫外灯下照就是那样,然后放到4℃冰箱了,今早发现沉淀的菌体净是绿色的(就在日光下)。请问怎么回事?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mengyouren: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-25 15:15:31
不用紫外线照射诱导出来后就是绿色的,我以前连到PET30A上做过的,
星陈代谢
2楼2013-04-25 11:04:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)

吸收488nm  发射507nm
当然能看到了,你用紫外干什么。。
3楼2013-04-25 12:22:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mengyouren: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-04-25 15:15:48
GFP蛋白本身肉眼观察是带绿色的,它在紫外下会发射荧光绿,这两种绿是不一样的,你在照紫外时可以把周围的自然光遮挡掉,这样看上去会明显点。普通的用来看EB胶的紫外投射仪或者凝胶成像系统都可以看到。
4楼2013-04-25 14:29:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mengyouren

铜虫 (著名写手)

送红花一朵
感谢各位!
5楼2013-04-25 16:28:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

黑色玻璃

新虫 (初入文坛)

楼主你的GFP基因是怎么标记到菌里面去的啊?能稳定表达吗?我现在在用转座子插入,但是总是不成功,会丢失
6楼2013-07-16 14:16:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 mengyouren 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0703化学调剂 +11 妮妮ninicgb 2026-03-15 15/750 2026-03-21 19:15 by ColorlessPI
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 317求调剂 +9 申子申申 2026-03-19 15/750 2026-03-21 17:31 by 学员8dgXkO
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 306求调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-18 4/200 2026-03-21 08:25 by laoshidan
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-17 3/150 2026-03-21 03:20 by JourneyLucky
[考研] 083200学硕321分一志愿暨南大学求调剂 +3 innocenceF 2026-03-17 3/150 2026-03-21 02:35 by JourneyLucky
[考研] 294求调剂材料与化工专硕 +15 陌の森林 2026-03-18 15/750 2026-03-20 23:28 by JourneyLucky
[考研] 一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂 +8 小材化本科 2026-03-18 8/400 2026-03-20 23:16 by JourneyLucky
[考研] 317求调剂 +5 申子申申 2026-03-19 9/450 2026-03-20 22:26 by JourneyLucky
[考研] 350求调剂 +5 weudhdk 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:04 by luoyongfeng
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 材料与化工专硕调剂 +7 heming3743 2026-03-16 7/350 2026-03-20 19:31 by zhukairuo
[考研] 086500 325 求调剂 +3 领带小熊 2026-03-19 3/150 2026-03-20 18:38 by 尽舜尧1
[考研] 广西大学家禽遗传育种课题组2026年硕士招生(接收计算机专业调剂) +3 123阿标 2026-03-17 3/150 2026-03-20 15:58 by 飞行琦
[考研] 298-一志愿中国农业大学-求调剂 +9 手机用户 2026-03-17 9/450 2026-03-20 14:24 by 无懈可击111
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
[考研] 085600材料与化工求调剂 +6 绪幸与子 2026-03-17 6/300 2026-03-19 13:27 by houyaoxu
[考研] 326求调剂 +5 上岸的小葡 2026-03-15 6/300 2026-03-17 17:26 by ruiyingmiao
[考研] 机械专硕325,寻找调剂院校 +3 y9999 2026-03-15 5/250 2026-03-16 19:58 by y9999
信息提示
请填处理意见