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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 带有GFP的E.coli BL21经IPTG诱导后菌体程绿色
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mengyouren

铜虫 (著名写手)

[求助] 带有GFP的E.coli BL21经IPTG诱导后菌体程绿色

请教高人，我将GFP基因连接在pET22(b)上，转化到E.coli BL21中，经IPTG诱导表达，我用紫外灯照了几下，也不确定是有绿色荧光，还是培养基在紫外灯下照就是那样，然后放到4℃冰箱了，今早发现沉淀的菌体净是绿色的（就在日光下）。请问怎么回事？
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mengyouren

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1楼 2013-04-25 10:44:37
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黑色玻璃

新虫 (初入文坛)
楼主你的GFP基因是怎么标记到菌里面去的啊？能稳定表达吗？我现在在用转座子插入，但是总是不成功，会丢失
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6楼2013-07-16 14:16:18
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kx444555

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mengyouren: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-04-25 15:15:31
不用紫外线照射诱导出来后就是绿色的，我以前连到PET30A上做过的，
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星陈代谢
2楼2013-04-25 11:04:07
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Haibara_Ai

铜虫 (小有名气)
吸收488nm  发射507nm
当然能看到了，你用紫外干什么。。
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3楼2013-04-25 12:22:24
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chlorella409

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mengyouren: 金币+10, ★★★★★最佳答案 2013-04-25 15:15:48
GFP蛋白本身肉眼观察是带绿色的，它在紫外下会发射荧光绿，这两种绿是不一样的，你在照紫外时可以把周围的自然光遮挡掉，这样看上去会明显点。普通的用来看EB胶的紫外投射仪或者凝胶成像系统都可以看到。
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4楼2013-04-25 14:29:41
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