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hmj仰望星空

新虫 (初入文坛)

[求助] 玉米中类胡萝卜素的测定，液相条件的确定，希望大侠们，帮帮忙

我现在做玉米中类胡萝卜素的含量的测定，目前需要拟定一个液相的条件，我跑了几次试验的结果都不太好，主要有两个峰，分不开，我用的是c18柱，我想问问，能不能给我些建议，怎么调节我的流动相？
液相条件是：
A:water：MTBE：MeOH=5：25：70
B:water：MTBE:MeOH=5:85:20
time        A        B
0        95        5
4.5        80        20
12.5        50        50
18        25        75
24        5        95
30        5        95

液相图.gif
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做一个内心强大，拥有足够正能量的女子，冷暖自知！
1楼 2013-04-24 10:24:23
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heyidong

铜虫 (正式写手)
这东西好像水 甲醇 直接梯度  水相从90便到10  100min就能跑出
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伤不起
2楼2013-04-25 17:02:46
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CAS_小龙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hmj仰望星空: 金币+5, ★★★很有帮助, 我再试试 谢谢 2013-04-27 15:48:44
你把A、B的交换一下试试，你走的这个方法5--95的，起始MeOH含量太大，将目标物很快洗脱下来，由出峰时间在4、5分钟可看出来，以致于分离效果不佳。
      或者可以先走个甲醇—水体系，梯度10—80（有机相从10到80），然后根据色谱图适当调整完善下方法，若出峰靠前，可尝试0—60或者0—30的梯度，若出峰靠后，可尝试30—90或者50—100梯度，调整方法使保留时间居中。若此时分离度还不佳，可尝试小梯度分离。
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3楼2013-04-26 00:25:09
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hmj仰望星空

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by CAS_小龙 at 2013-04-26 00:25:09
你把A、B的交换一下试试，你走的这个方法5--95的，起始MeOH含量太大，将目标物很快洗脱下来，由出峰时间在4、5分钟可看出来，以致于分离效果不佳。
      或者可以先走个甲醇—水体系，梯度10—80（有机相从10到80 ...

我还想问个问题，我的现在用的柱子是ZORBAX 300SB c18 我看网上的介绍说这个类型的柱子主要是用来分离蛋白质和多肽的，我想问问它适合用来分离类胡萝卜素吗
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4楼2013-04-27 15:50:11
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CAS_小龙

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by hmj仰望星空 at 2013-04-27 15:50:11
我还想问个问题，我的现在用的柱子是ZORBAX 300SB c18 我看网上的介绍说这个类型的柱子主要是用来分离蛋白质和多肽的，我想问问它适合用来分离类胡萝卜素吗...

你那个柱子我不太熟悉，但一般来说主要用来分离蛋白质和多肽说明其选择性好，分离这些物质比较适合，分离其他物质也可以的，只是选择性稍差点而已。
你不放心，可以走一针标样看看是否合适。
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5楼2013-04-27 21:48:00
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hmj仰望星空

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by CAS_小龙 at 2013-04-27 21:48:00
你那个柱子我不太熟悉，但一般来说主要用来分离蛋白质和多肽说明其选择性好，分离这些物质比较适合，分离其他物质也可以的，只是选择性稍差点而已。
你不放心，可以走一针标样看看是否合适。...

我走了一次甲醇和水体系，根本没有出一个峰，这是什么问题呢？会不会是我的样品有问题呢？
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6楼2013-05-02 13:20:10
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huihui2255365

金虫 (小有名气)
换根长柱子试试。。。。。
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7楼2013-05-02 16:21:33
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