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hmj仰望星空

新虫 (初入文坛)

[求助] 玉米中类胡萝卜素的测定,液相条件的确定,希望大侠们,帮帮忙

我现在做玉米中类胡萝卜素的含量的测定,目前需要拟定一个液相的条件,我跑了几次试验的结果都不太好,主要有两个峰,分不开,我用的是c18柱,我想问问,能不能给我些建议,怎么调节我的流动相?
液相条件是:
A:water:MTBE:MeOH=5:25:70
B:water:MTBE:MeOH=5:85:20
time        A        B
0        95        5
4.5        80        20
12.5        50        50
18        25        75
24        5        95
30        5        95

液相图.gif
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heyidong

铜虫 (正式写手)

这东西好像水 甲醇 直接梯度  水相从90便到10  100min就能跑出
伤不起
2楼2013-04-25 17:02:46
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CAS_小龙

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hmj仰望星空: 金币+5, ★★★很有帮助, 我再试试 谢谢 2013-04-27 15:48:44
你把A、B的交换一下试试,你走的这个方法5--95的,起始MeOH含量太大,将目标物很快洗脱下来,由出峰时间在4、5分钟可看出来,以致于分离效果不佳。
      或者可以先走个甲醇—水体系,梯度10—80(有机相从10到80),然后根据色谱图适当调整完善下方法,若出峰靠前,可尝试0—60或者0—30的梯度,若出峰靠后,可尝试30—90或者50—100梯度,调整方法使保留时间居中。若此时分离度还不佳,可尝试小梯度分离。
3楼2013-04-26 00:25:09
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hmj仰望星空

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by CAS_小龙 at 2013-04-26 00:25:09
你把A、B的交换一下试试,你走的这个方法5--95的,起始MeOH含量太大,将目标物很快洗脱下来,由出峰时间在4、5分钟可看出来,以致于分离效果不佳。
      或者可以先走个甲醇—水体系,梯度10—80(有机相从10到80 ...

我还想问个问题,我的现在用的柱子是ZORBAX 300SB c18 我看网上的介绍说这个类型的柱子主要是用来分离蛋白质和多肽的,我想问问它适合用来分离类胡萝卜素吗
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4楼2013-04-27 15:50:11
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CAS_小龙

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hmj仰望星空 at 2013-04-27 15:50:11
我还想问个问题,我的现在用的柱子是ZORBAX 300SB c18 我看网上的介绍说这个类型的柱子主要是用来分离蛋白质和多肽的,我想问问它适合用来分离类胡萝卜素吗...

你那个柱子我不太熟悉,但一般来说主要用来分离蛋白质和多肽说明其选择性好,分离这些物质比较适合,分离其他物质也可以的,只是选择性稍差点而已。
你不放心,可以走一针标样看看是否合适。
5楼2013-04-27 21:48:00
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hmj仰望星空

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by CAS_小龙 at 2013-04-27 21:48:00
你那个柱子我不太熟悉,但一般来说主要用来分离蛋白质和多肽说明其选择性好,分离这些物质比较适合,分离其他物质也可以的,只是选择性稍差点而已。
你不放心,可以走一针标样看看是否合适。...

我走了一次甲醇和水体系,根本没有出一个峰,这是什么问题呢?会不会是我的样品有问题呢?
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6楼2013-05-02 13:20:10
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huihui2255365

金虫 (小有名气)

换根长柱子试试。。。。。
7楼2013-05-02 16:21:33
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