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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 载体上临近的两个酶切位点可以设计起来做双酶切吗？
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wx1990

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

理论上可以，我最近做了个双酶切实验，两个酶切位点之间相隔五六个碱基，效果不错，但是最好不要紧挨着
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努力做最好的自己！面对纷繁复杂的人和事要有一颗从容淡定的心！
11楼2013-05-06 22:07:45
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呀薯条

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by cory0931 at 2013-04-26 17:37:15
on yr re:
质粒的两个酶切位点，紧挨着的话，势必会影响双酶切效果，原因是：
内切酶结合时，一般都是需要微点周围有多余碱基，否则影响结合；
再者，酶切后的粘性末端不余怒重合；
若是连个酶切位点之间有几个 ...

麻烦问下，那两条引物上连的所需酶切位点的序列的跟质粒上所标注的酶切位点的顺序有关吗？
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12楼2013-12-11 09:10:39
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梓汐

铁虫 (正式写手)
引用回帖:
11楼: Originally posted by wx1990 at 2013-05-06 22:07:45
理论上可以，我最近做了个双酶切实验，两个酶切位点之间相隔五六个碱基，效果不错，但是最好不要紧挨着

请问这种情况您当时酶切几个小时呢
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13楼2015-08-25 19:53:39
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