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匿名

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山水88

木虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by jianglan1991 at 2013-04-24 12:51:47
应该是我的蛋白量比较少,所以大瓶摇后直接取样跑SDS-PAGE检测不到,后来我就收集了菌体,然后在从我的菌体收集液中取样跑电泳,诱前,诱后一对照,就发现了目的蛋白。你的表达遇到了什么问题,咱们可以相互交流一 ...

目前还是小瓶发酵,相同的质粒在BL21中表达都非常明显,但是在我这个菌中表达目的蛋白表达特别少,正在摸索诱导条件等,不过前期有一次和BL21同时做时都有大量表达,所以现在很纠结到底是什么原因了。
11楼2013-04-24 13:27:33
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

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myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香。期待你的慷慨解囊。快乐每一天鼓励虫子来到生物版块交流,期待你的精彩1 2013-04-22 08:51:39
扩大规模后由于摇震速度和培养容器问题,细菌生长和通气量都会不同,诱导结果可能有所不同。你是否严格控制了诱导前后菌的OD?
2楼2013-04-22 01:05:07
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senix

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,鼓励应助,分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-24 08:43:29
诱导前的OD值最好控制在0.8左右!
做实验就是和上帝玩游戏!
3楼2013-04-22 09:48:53
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匿名

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4楼2013-04-22 10:07:46
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