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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 农杆菌介导转化技术
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寒冰利剑

金虫 (小有名气)

[求助] 农杆菌介导转化技术 已有2人参与

Sample TextSample Text3Sample Text

各位师兄师姐，小弟最近正在做农杆菌侵染实验，但共培养后的外植体用无菌蒸馏水清洗后总是返菌，抗生素已经加到最大了，求助各位高手，为我指点迷津，顺便问一句，各位清洗共培养后的外植体只用无菌蒸馏水吗？谢谢各位。
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岂能尽如人意，但求无愧我心。
1楼 2013-04-19 23:47:50
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419249049

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

楼主应该做一个cef对外植体的敏感度试验，以确定多高浓度的cef不会对外植体发育造成影响。确定出最高浓度的cef后，可以在共培养结束后，将外植体放入含有最高浓度cef的液体共培养基中，在摇床上震荡30min，然后取出外植体转入含有cef的固体培养基中培养，定期更换培养基，最好不超过两周要换一次培养基。
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11楼2015-02-03 15:28:34
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hnndljd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-04-21 01:01:00
我们这里是的
无菌水洗三次
转到含抗生素的培养基上
培养基里的抗生素是过滤灭菌的
然后在培养基高温灭菌之后，放置到40度左右（摸起来不烫手）再加进去
然后倒平板的

外植体本身不带菌吧？返菌返的是不是杂菌啊，如果是大田采样要注意这个。
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十年树木，百年树人
2楼2013-04-20 01:33:08
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寒冰利剑

金虫 (小有名气)
外植体不带落，返的菌应该是农杆菌，也不知该怎么办才好。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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岂能尽如人意，但求无愧我心。
3楼2013-04-21 00:30:30
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寒冰利剑

金虫 (小有名气)
外植体不带菌。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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岂能尽如人意，但求无愧我心。
4楼2013-04-21 00:40:14
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