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xuuue

[交流] [交流求助]CTAB法提DNA出现问题

小生用CTAB法提植物叶片DNA,用乙醇沉淀DNA时,除了絮状沉淀外,还出现大量碎末状沉淀,不知道是什么东西?恳请各位大虾不吝赐教。
    提取液中氯化钠的浓度为2M,以前1.4M时也有这种情况出现,不知道是不是盐离子浓度太大的原因。
    先谢谢各位了。
[search]提取DNA[/search]
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runrunrun

金虫 (正式写手)

哥们是如何 验证的,到底多少浓度才算适合?
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3楼2007-09-21 13:57:08
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xuuue


plantsoil(金币+1,VIP+0):呵呵,反馈很重要
经过试验,是盐离子浓度太大了。
2楼2007-09-21 07:50:52
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jjg0912

木虫 (正式写手)

碎沫状沉淀是DNA还是蛋白?
4楼2007-09-23 15:41:26
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guohuayin

木虫 (著名写手)

博士,副教授

★ ★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
plantsoil(金币+1,VIP+0):补充奖励
我觉得碎末状沉淀是你没有去除干净的蛋白质,在苯酚-氯仿重提阶段,建议不要为了获取大量的的DNA而将中间的那层吸出来,那层是蛋白质,吸取上清液的时候,在最后快要吸完的时候,最好不要继续吸出了,防止蛋白质污染。
     建议你用苯酚-氯仿抽提一次,再用氯仿:异戊醇抽提一次。
并且用70%的酒精多洗涤几次,酒精洗涤的作用主要是去除盐分。最后酒精洗涤完后,一定要晾干后再用适量的双蒸水溶解或者TE缓冲液溶解。
内生菌资源和核酸分子的利用
5楼2007-09-23 18:35:15
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