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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » [交流求助]CTAB法提DNA出现问题
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xuuue

[交流] [交流求助]CTAB法提DNA出现问题

小生用CTAB法提植物叶片DNA，用乙醇沉淀DNA时，除了絮状沉淀外，还出现大量碎末状沉淀，不知道是什么东西？恳请各位大虾不吝赐教。
    提取液中氯化钠的浓度为2M，以前1.4M时也有这种情况出现，不知道是不是盐离子浓度太大的原因。
    先谢谢各位了。
[search]提取DNA[/search]
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1楼 2007-09-18 21:24:26
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runrunrun

金虫 (正式写手)
哥们是如何 验证的,到底多少浓度才算适合?
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3楼2007-09-21 13:57:08
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xuuue

★
plantsoil(金币+1,VIP+0):呵呵，反馈很重要
经过试验，是盐离子浓度太大了。
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2楼2007-09-21 07:50:52
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jjg0912

木虫 (正式写手)
碎沫状沉淀是DNA还是蛋白?
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4楼2007-09-23 15:41:26
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guohuayin

木虫 (著名写手)

博士，副教授
★ ★
johnsooh(金币+1,VIP+0):thx
plantsoil(金币+1,VIP+0):补充奖励
我觉得碎末状沉淀是你没有去除干净的蛋白质，在苯酚－氯仿重提阶段，建议不要为了获取大量的的DNA而将中间的那层吸出来，那层是蛋白质，吸取上清液的时候，在最后快要吸完的时候，最好不要继续吸出了，防止蛋白质污染。
     建议你用苯酚－氯仿抽提一次，再用氯仿：异戊醇抽提一次。
并且用70％的酒精多洗涤几次，酒精洗涤的作用主要是去除盐分。最后酒精洗涤完后，一定要晾干后再用适量的双蒸水溶解或者TE缓冲液溶解。
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内生菌资源和核酸分子的利用
5楼2007-09-23 18:35:15
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