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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 菌分离纯化的问题！！！麻烦大家帮帮忙！！！万分感谢！！！
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wuguang2013

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
guizhu2228: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-04-23 17:51:19
哈哈哈我以前大学的时候也遇到了这样的情况！我的放线菌也和细菌混在一起，怎么分也分不开，但是之后我老是告诉我怎么做以后我就明白了：培养基用高氏一号，固体，加链霉素，38度恒温培养，当然是划线！等长出来以后挑取放线菌的再在同样的条线下划线，直至划出来放线菌单菌落为止！肯定可以的！加油哦！
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乐天派广！牙齿天天晒太阳！！！
21楼2013-04-22 21:01:42
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guizhu2228

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
20楼: Originally posted by 见神一笑 at 2013-04-22 16:03:21
你自己的培养基也可以尝试加点酚，应该对培养基没有太大影响。不管染的是什么细菌，用酚应该都能抑制...

不好意思，能具体说一下嘛，用什么酚，加的量大体是多少呢，我现在将孢子液涂布在含有重铬酸钾的培养基中，快4天了，平板上啥都没有，也没有杂菌，也不长我的菌，我做的空白，就是同样的孢子液涂布在正常的平板上，也是啥都没长，是还没到天数吗，不会就不长了吧？？？
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22楼2013-04-23 09:26:40
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guizhu2228

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by wuguang2013 at 2013-04-22 21:01:42
哈哈哈我以前大学的时候也遇到了这样的情况！我的放线菌也和细菌混在一起，怎么分也分不开，但是之后我老是告诉我怎么做以后我就明白了：培养基用高氏一号，固体，加链霉素，38度恒温培养，当然是划线！等长出来以后 ...

我的菌一般是在29度下培养，38度这个温度的选择是根据自己的菌定的吗？链霉素加的量是多少呢？一定要用高氏一号吗？能说一下为啥吗？万分感谢~~现在得不到纯菌，啥都做不了，都快烦死了。。。。
我现在将孢子液涂布在含有重铬酸钾的培养基中，快4天了，平板上啥都没有，也没有杂菌，也不长我的菌，我做的空白，就是同样的孢子液涂布在正常的平板上，也是啥都没长，是还没到天数吗，不会就不长了吧？？？
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23楼2013-04-23 09:30:33
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wuguang2013

银虫 (正式写手)
为什么金币都给别人了！诶！我一个都木得到！
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乐天派广！牙齿天天晒太阳！！！
24楼2013-04-23 16:40:05
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guizhu2228

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
24楼: Originally posted by wuguang2013 at 2013-04-23 16:40:05
为什么金币都给别人了！诶！我一个都木得到！

不好意思，一开始不会给金币
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25楼2013-04-23 17:51:33
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guizhu2228

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
21楼: Originally posted by wuguang2013 at 2013-04-22 21:01:42
哈哈哈我以前大学的时候也遇到了这样的情况！我的放线菌也和细菌混在一起，怎么分也分不开，但是之后我老是告诉我怎么做以后我就明白了：培养基用高氏一号，固体，加链霉素，38度恒温培养，当然是划线！等长出来以后 ...

不好意思，能回答一下我上面的问题吗？
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26楼2013-04-23 17:52:07
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wuguang2013

银虫 (正式写手)
引用回帖:
23楼: Originally posted by guizhu2228 at 2013-04-23 09:30:33
我的菌一般是在29度下培养，38度这个温度的选择是根据自己的菌定的吗？链霉素加的量是多少呢？一定要用高氏一号吗？能说一下为啥吗？万分感谢~~现在得不到纯菌，啥都做不了，都快烦死了。。。。
我现在将孢子液涂 ...

因为38度不适合细菌生长，细菌长得慢，而放线菌可以；链霉素你按终浓度100PPM的量来加吧，我当时没有定量，加的比较多，高氏一号是培养放线菌的培养基，营养成分简单，细菌长不好，但放线菌可以长得很好。当你按照我说的做了以后，第一次培养时间长点，等放线菌长得比细菌好，且盖过细菌以后，再划线转下一代，培养基如上。
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乐天派广！牙齿天天晒太阳！！！
27楼2013-04-23 19:32:02
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见神一笑

木虫 (著名写手)
引用回帖:
22楼: Originally posted by guizhu2228 at 2013-04-23 09:26:40
不好意思，能具体说一下嘛，用什么酚，加的量大体是多少呢，我现在将孢子液涂布在含有重铬酸钾的培养基中，快4天了，平板上啥都没有，也没有杂菌，也不长我的菌，我做的空白，就是同样的孢子液涂布在正常的平板上， ...

貌似哪里都没有提到用的哪种酚。我不是做放线菌的，也不太清楚。我问了一个做放线菌的同学，他们实验室用的是制霉菌素或放线菌酮抗真菌，萘啶酮酸抗细菌。萘啶酮酸配成配成25mg/mL的母液，然后一升培养基里加1mL。萘啶酮酸要现配，溶解在0.1M的NaoHi溶液里。我只知道这些了，供楼主参考。
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好好努力
28楼2013-04-23 20:43:31
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54小伟

木虫 (小有名气)
可以试一下先用无菌水倍比稀释，然后用液体划线，我以前是两种细菌混在一起，用适合自己要的菌的培养基培养，还是有了单菌落的。
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无论何时开始都不会晚
29楼2013-04-23 22:53:27
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guizhu2228

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
27楼: Originally posted by wuguang2013 at 2013-04-23 19:32:02
因为38度不适合细菌生长，细菌长得慢，而放线菌可以；链霉素你按终浓度100PPM的量来加吧，我当时没有定量，加的比较多，高氏一号是培养放线菌的培养基，营养成分简单，细菌长不好，但放线菌可以长得很好。当你按照 ...

谢谢了~~
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30楼2013-04-24 08:47:08
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