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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求各位大师看看细胞上粘附的气泡是怎么回事？
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user59888

金虫 (文坛精英)

宫创始人 ------小妮

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+3, 看在头像的份上也要奖励 2013-04-17 16:38:41
体外三维培养观察细胞管道形成能力
1）从-20℃中取出保存的Matrigel，在-4℃下过夜使之融解成为液态。微量移液枪头和24孔细胞培养板预先冰上预冷。
2）取24孔培养板每孔加入300μl Matrigel原液，小心摇动使之均匀分布于孔的各个部位并避免产生气泡。所有操作必须在冰上进行。37℃培养箱内孵育30min待其凝固。
3）用0.25%胰酶消化各组细胞至单细胞悬液，在每孔内接种1ml浓度为5×105/ml的各组细胞悬液，分别置于常氧及缺氧条件下继续培养。
4）12h后终止培养，观察各组食管癌及胃癌细胞的管状结构排列情况和完整程度。随机于倒置显微镜下(×200)取上、下、左、右、中心5个视野摄像记录并计数管状结构数量，取每个视野的均值。重复实验三次  你是这个步鄹吗
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此人已死，没烧纸的半夜出来喝酒
11楼2013-04-17 15:00:10
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renshaofang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
11楼: Originally posted by user59888 at 2013-04-17 15:00:10
体外三维培养观察细胞管道形成能力
1）从-20℃中取出保存的Matrigel，在-4℃下过夜使之融解成为液态。微量移液枪头和24孔细胞培养板预先冰上预冷。
2）取24孔培养板每孔加入300μl Matrigel原液，小心摇动使之均 ...

不是啊，只是普通培养而已，从液氮拿出来，加10G重悬，就接种了
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12楼2013-04-17 15:46:04
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Rene333

铁虫 (初入文坛)
同觉得是分裂的细胞,不用担心。
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13楼2013-04-18 16:20:19
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renshaofang

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by Rene333 at 2013-04-18 16:20:19
同觉得是分裂的细胞,不用担心。

谢谢。
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14楼2013-04-19 09:07:23
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

复苏时候的温度升高过慢导致的？又或者是瓶子没硅化好？细胞看起来已经舒展了一部分，形态什么的么有塌缩，应该是好的。楼主培养培养看。或者换个瓶子复苏看看。
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15楼2013-04-19 14:30:19
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LingerMM

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该是在分裂的细胞，好多都是一对一对的
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16楼2013-04-19 17:16:44
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