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renshaofang

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
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在线: 65.1小时
虫号: 1383421
注册: 2011-08-29
专业: 发育生物学与生殖生物学

[求助] 求各位大师看看细胞上粘附的气泡是怎么回事？

不知道为什么，细胞复苏以后，就有很多气泡粘附在细胞上，
这是肿瘤细胞，这状态应该怎么改呢？
用的是1640+10%胎牛血清（国产的）

IMG_4270.JPG

IMG_4271.JPG

IMG_4270_副本.jpg

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1楼 2013-04-16 09:32:08

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user59888

金虫 (文坛精英)

宫创始人 ------小妮

应助: 461 (硕士)
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专业: 食品加工技术

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+3, 看在头像的份上也要奖励 2013-04-17 16:38:41

体外三维培养观察细胞管道形成能力
1）从-20℃中取出保存的Matrigel，在-4℃下过夜使之融解成为液态。微量移液枪头和24孔细胞培养板预先冰上预冷。
2）取24孔培养板每孔加入300μl Matrigel原液，小心摇动使之均匀分布于孔的各个部位并避免产生气泡。所有操作必须在冰上进行。37℃培养箱内孵育30min待其凝固。
3）用0.25%胰酶消化各组细胞至单细胞悬液，在每孔内接种1ml浓度为5×105/ml的各组细胞悬液，分别置于常氧及缺氧条件下继续培养。
4）12h后终止培养，观察各组食管癌及胃癌细胞的管状结构排列情况和完整程度。随机于倒置显微镜下(×200)取上、下、左、右、中心5个视野摄像记录并计数管状结构数量，取每个视野的均值。重复实验三次你是这个步鄹吗