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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 5L搅拌罐染菌
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)

[求助] 5L搅拌罐染菌

实验室最近上罐老染菌，5L的百仑搅拌罐，装液量3.5L，离位灭菌，121°，30min。
自备小型空压机，压缩空气入罐前过0.2um空气滤膜，培养基乳糖（3%）、酵母浸粉（0.3%）。
空培15h后染菌，可能原因在哪？排除发酵罐漏气，灭菌不彻底，空气滤膜（3支精密滤膜串联），哪位大虫能给点建设性意见！
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木有签名呀！
1楼 2013-04-15 16:27:54
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tanche163

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
请先镜检，确定杂菌种类。如果染菌为芽孢杆菌，因其耐热可能是灭菌不彻底，如果是霉菌，可能是空气中带过来的，比如通气带入或者漏气。
1. 是否是空气滤膜问题：（1）不通气空培养，夹住进出气管路；（2）滤膜全部更换。如果继续染菌，则可能灭菌不彻底或不密闭。
2. 检查气密性，lz用酒精检查我是第一次看到这样的方法，很山寨。
3. 考虑之前发酵正常时灭菌条件是否和现在一致？分析哪些因素发生改变
我暂时就想到这么多
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阳光总在风雨后
10楼2013-04-15 22:50:22
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匿名

用户注销 (知名作家)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
毛桃就是我: 金币+5, ★有帮助 2013-04-15 16:44:54
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2楼2013-04-15 16:40:04
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毛桃就是我

银虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by shangyukuan at 2013-04-15 16:40:04
0~15小时有没有补过料呀，罐子上的那个取样管是不是原装的呀？你检查过没有，我这两个他们10L的罐，两个原装的取样管都是在支管焊接的地方漏，还有呀，3个过滤器你要能确定至少有1个是完好的，

首先感谢大侠帮忙！
没有补过料
取样管是橡胶管 和罐体相连的金属导管处接的橡胶管 用夹子缠绕 用酒精检查过了 没有漏气
过滤器一个全新的 2个半旧的
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木有签名呀！
3楼2013-04-15 16:48:46
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匿名

用户注销 (知名作家)
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4楼2013-04-15 17:05:02
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