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mayinghui

新虫 (初入文坛)

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[求助] 噬菌体肽库技术筛选酶结合蛋白已有1人参与

各位专家，小弟刚开始做噬菌体肽库技术筛选酶结合蛋白，以前从没做过这方面的东西，有谁能给小弟指导下，小弟将不胜感激！主要有以下问题
1. 噬菌体肽库技术我想筛选一种酶的抑制蛋白，要用噬菌体随机肽库好，还是七肽库等其它的，这些肽库是不是淘洗孵化后，外源蛋白就已经表达在噬菌体外壳蛋白中了？？还有在哪能买到这种肽库贵不贵
2. 买来的肽库是不是直接可以进行按照说明书淘洗，里面用不用再加入辅助噬菌体，看到很多资料都用到辣椒素过氧化物酶是干啥用的
3. 筛选到的阳性克隆，是不是还得将噬菌体外壳蛋白分离纯化出来，才能测定氨基酸序列，噬菌体库技术目的是筛选蛋白，是不是还得测序获得目标蛋白的序列才是最终目的。
这些我都不懂，请各位大侠多多指导！！！

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1楼 2013-04-15 10:26:12

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yanhuangzi

铁虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-31 16:01:27

1.肽库各有优劣，按需选择。肽库外源蛋白是已经表达在噬菌体外壳蛋白中，我们实验室用的肽库是 NEW ENGLAND BIOLABS的，具体网上可以查到，肽库好像7000多吧。
2.买来的肽库可以按说明书直接淘洗，噬菌粒作为载体转化进入大肠杆菌后需要辅助噬菌体，直接淘洗不用。
3.筛选到的阳性克隆通过测插入的外源基因序列，即表达外源蛋白的基因序列。
可能有些说的不对，你可以再找找资料。

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