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mayinghui

新虫 (初入文坛)

[求助] 噬菌体肽库技术筛选酶结合蛋白 已有1人参与

各位专家,小弟刚开始做噬菌体肽库技术筛选酶结合蛋白,以前从没做过这方面的东西,有谁能给小弟指导下,小弟将不胜感激!主要有以下问题
1. 噬菌体肽库技术  我想筛选一种酶的抑制蛋白,要用噬菌体随机肽库好,还是 七肽库 等其它的,这些肽库是不是淘洗孵化后,外源蛋白就已经表达在噬菌体外壳蛋白中了??  还有在哪能买到这种肽库 贵不贵
2. 买来的肽库是不是直接可以进行按照说明书淘洗,里面用不用再加入辅助噬菌体,看到很多资料都用到辣椒素过氧化物酶 是干啥用的
3. 筛选到的阳性克隆,是不是还得将噬菌体外壳蛋白分离纯化出来,才能测定氨基酸序列,噬菌体库技术 目的是筛选蛋白  ,是不是还得测序获得目标蛋白的序列才是最终目的。
这些 我都不懂,请各位大侠 多多指导!!!
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yanhuangzi

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-31 16:01:27
1.肽库各有优劣,按需选择。肽库外源蛋白是已经表达在噬菌体外壳蛋白中,我们实验室用的肽库是 NEW ENGLAND BIOLABS的,具体网上可以查到,肽库好像7000多吧。
2.买来的肽库可以按说明书直接淘洗,噬菌粒作为载体转化进入大肠杆菌后需要辅助噬菌体,直接淘洗不用。
3.筛选到的阳性克隆通过测插入的外源基因序列,即表达外源蛋白的基因序列。
可能有些说的不对,你可以再找找资料。
2楼2013-12-27 05:18:11
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