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yq19880610

新虫 (初入文坛)

[求助] PCR跑电泳

PCR跑电泳 刚提好的时候跑内参还有引物都能出条带 但是过了一周两周再重新按原来条件扩增就只有内参出条带了 这是怎么回事啊？内参也没有之前亮了，会不会是cDNA降解了啊？
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1楼 2013-04-13 14:07:37
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yujitianqing

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
yq19880610(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-14 21:26:34
cDNA保存在-20℃的话一般不会出问题，一般是PCR过程出问题可能性比较大，有可能可能你加样后把目的基因打断了……PCR经常会出现一些意外，你就再小体系试一次吧……
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2楼2013-04-13 17:21:32
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-14 21:26:45
cDNA经过冻化质量会有一定下降，单链的cDNA也不如双链来的稳定。但一般在短时间内不会出现特别大的差别，可能是你PCR时候的条件没有控制好，也可以适当增加一点模板的用量。
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3楼2013-04-14 01:00:50
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yq19880610

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yujitianqing at 2013-04-13 17:21:32
cDNA保存在-20℃的话一般不会出问题，一般是PCR过程出问题可能性比较大，有可能可能你加样后把目的基因打断了……PCR经常会出现一些意外，你就再小体系试一次吧……

目的基因打断是什么意思？
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4楼2013-04-14 15:52:53
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