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小米蓉

新虫 (初入文坛)

[求助] 荧光显微镜观察细胞 照片上显示有杂质 已有2人参与

细胞荧光染色后,荧光显微镜观察,结果很多都有类似图片中那层黄色的杂质,下图是比较严重的,请问可能是什么原因导致的?盖玻片,载玻片每洗干净,还是其他什么原因?

捕获.PNG
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sun_in_night

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

背景的自发荧光本来就是很难去除的。一些建议:(1)加个空白对照,没荧光体系,那就能区分哪些是自发的背景荧光了(2)缩小接受光的光栅范围,例如GFP一般在510左右,那就尽量把光圈缩小在这个范围上下。当然缩小了光圈,信号强度也就弱了,所以得你自己把握(3)放大图像,只看哪些你能很清楚看到荧光信号的细胞,放大那个细胞。周围的背景也就减少了。
3楼2014-02-25 21:59:45
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loseing2013

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

封片液中的成分吧
2楼2014-02-25 16:53:58
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