应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » cDNA电泳图
111/2返回列表12下一页
查看: 2469  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

245087116

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA电泳图

第三个泳道是反转后的cDNA电泳图，marker是5000的，感觉反转后的条带比较小，大约在1000bp以下，这样的CDNA能用吗，能扩增出大片段吗，请高手帮忙分析原因，跪谢！！！

电泳图.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-04-12 16:13:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

245087116

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-14 00:37:41
RNA不会影响PCR，因为DNA聚合酶不能以RNA为模板。你直接PCR就行了。...

恩恩  谢谢你···
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2013-04-16 14:09:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
245087116(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-13 10:20:01
反转录后消化RNA模板了吗？电泳的上样量是多少？
赞一下 回复此楼
2楼2013-04-13 05:40:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

245087116

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-13 05:40:14
反转录后消化RNA模板了吗？电泳的上样量是多少？

消化RNA模板？啥意思，我反转之前消化的基因组DNA。此电泳上样量为3ul，麻烦您帮我分析一下，谢谢！！！
赞一下 回复此楼
3楼2013-04-13 09:05:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 245087116 at 2013-04-13 09:05:58
消化RNA模板？啥意思，我反转之前消化的基因组DNA。此电泳上样量为3ul，麻烦您帮我分析一下，谢谢！！！...

你是说只合成了第一条cDNA链吗？那样的话，电泳是看不到的。除非你合成了cDNA第一条链后又进行特异性扩增。你是用的总RNA为模板反转录吗？如果反转录里面的RNA模板没有除去的话，跑电泳会看到RNA的。因为我觉得你的电泳条带有点象rRNA，所以问问。
赞一下 回复此楼
4楼2013-04-13 12:00:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

245087116

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-13 12:00:18
你是说只合成了第一条cDNA链吗？那样的话，电泳是看不到的。除非你合成了cDNA第一条链后又进行特异性扩增。你是用的总RNA为模板反转录吗？如果反转录里面的RNA模板没有除去的话，跑电泳会看到RNA的。因为我觉得你的 ...

奥··· 我明白你的意思了，如果是这种情况该怎么办呢，我还没进行PCR呢，如果有rRNA的话，应该对后续没影响吧？谢谢！
赞一下 回复此楼
5楼2013-04-13 12:52:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mirongsheng

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
先以这个cDNA为模板扩扩你的目的基因，能扩出来就是王道，我们做反转录以后重来不跑cDNA电泳图
赞一下 回复此楼
mi
6楼2013-04-13 19:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 245087116 at 2013-04-13 12:52:40
奥··· 我明白你的意思了，如果是这种情况该怎么办呢，我还没进行PCR呢，如果有rRNA的话，应该对后续没影响吧？谢谢！...

RNA不会影响PCR，因为DNA聚合酶不能以RNA为模板。你直接PCR就行了。
赞一下 回复此楼
7楼2013-04-14 00:37:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fanfenggui

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

cDNA跑胶就是看不见东西吧！
赞一下 回复此楼
爱由心起！
8楼2013-04-15 16:30:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

德国工兵铲

金虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-04-14 00:37:41
RNA不会影响PCR，因为DNA聚合酶不能以RNA为模板。你直接PCR就行了。...

我在一本书上看到，RNA是很影响PCR的，因为RNA与镁离子结合的能力非常强，进而影响酶活性。
赞一下 回复此楼
10楼2013-04-17 16:56:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 245087116 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭