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履霜

木虫 (正式写手)

[求助] DNA提取

做的是微量DNA甲基化修饰后,然后离心柱提取。
用的是EpiGenTek-Mthylamp Whole cell bisulfite modification Kit


第一个问题:异丙醇加错了,加成乙醇了
这个试剂盒的给了我一个中文的说明书。
在第5步的时候,中文说明书里面写的是加入100%的乙醇,但是英文说明书里面是加入100%的异丙醇。
我加入乙醇之后,出现白色的絮状物了。
加成乙醇会不会影响到DNA的提取。


第二个问题:在后面几步,加入70%乙醇,或者90%乙醇之后,还没有离心,液体就通过离心柱的膜,渗漏下去了,在最后一步洗脱的时候更是如此,刚加上洗脱液,静置了3分钟,就发现离心柱下面开始渗漏液体了。这里面需要离心的转数都是12000转/分钟
离心柱会出现这种问题吗?

附件是我用的试剂盒的说明书,我出错的是在第5步。

谢谢了,急死我了~
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  • 附件 1 : EpiGenTek-MthylampWholecellbisulfitemodificationKit说明书.pdf
  • 2013-04-11 16:57:41, 307.04 K

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zmsyzxy

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
履霜: 金币+4, ★★★很有帮助 2013-04-26 08:36:14
第一个问题,加成乙醇没问题;第二个问题如果没有捅破滤网应该问题不大
3楼2013-04-25 19:58:58
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ADTechnology

捐助贵宾 (著名写手)

表观遗传学专业供应商


【答案】应助回帖

★
履霜: 金币+1, ★有帮助 2013-04-26 08:36:24
不知您后续跑PCR是什么情况呢?
2楼2013-04-17 21:05:22
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