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dongyanqutao

铜虫 (初入文坛)

[求助] PCR

今天刚合回来引物，跑15ul体系梯度都挺好的，为什么跑25ul体系准备做回收就没有东西了呢？
上一次的引物也是这样，还请大侠给分析一下
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1楼 2013-04-10 19:04:08
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小科研女dow

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
说明第二次没P出来呀
你可以做俩15的一起回收呀
不也一样么
怀疑是不是被污染了或者什么
建议你再做一次
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做出色的科研人
2楼2013-04-10 21:25:37
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genolab

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是什么引物?
第一次扩增出来是否是污染导致的?
第二次没有出来,是PCR反应体系有问题还是加样出现问题?
在摸索一下试试.
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3楼2013-04-11 08:56:22
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dongyanqutao

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 小科研女dow at 2013-04-10 21:25:37
说明第二次没P出来呀
你可以做俩15的一起回收呀
不也一样么
怀疑是不是被污染了或者什么
建议你再做一次

今天又做了2次15微升体系的，可是结果和昨天是一样的，污染？应该不会吧，还请再给分析一下
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4楼2013-04-11 16:10:13
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dongyanqutao

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by genolab at 2013-04-11 08:56:22
是什么引物?
第一次扩增出来是否是污染导致的?
第二次没有出来,是PCR反应体系有问题还是加样出现问题?
在摸索一下试试.

简并引物，AOX，第一次扩出来是污染所致？这个怎么解释？
体系应该不会有问题因为今天我有按照梯度的体系跑了一次结果还是没有东西，加样的问题的话，这个也不大可能，因为我让实验室的师姐也给加过，结果也是这样的
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5楼2013-04-11 16:13:30
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