应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 懂细胞的高手们请来看看我的原代肝细胞吧。。。 有些问题想请教
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1283  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

lamborghini_

铜虫 (正式写手)

[交流] 懂细胞的高手们请来看看我的原代肝细胞吧。。。 有些问题想请教 已有3人参与

最近都在提大鼠原代肝细胞，用的是两步灌流法，提一次很费劲，但是细胞养两天就死掉了，无法进行实验。昨天又提了一次，我拍了几张照片，想请大神们看看我的细胞活性，因为我不知道如何判断细胞状态好坏。
      种的是24孔板，之前铺过鼠尾胶原，过夜放置，拍的照片是种板后24小时。用pbs冲洗的时候会明显看到有东西被吹起来。
      还有个问题，最后一张图片中用红圈标示出来的，很小的那种类似于气泡的东西是什么？以前用培养瓶是看不到这种东西的..
谢谢各位大神了~

01.jpg



03.jpg



02`.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
以勤奋为信仰者必成大器
1楼 2013-04-10 13:50:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末香

木虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
karl2100: 金币+1, 谢谢回复！ 2013-05-03 23:28:22
我也是做原代肝细胞，青春都耗在这上面了。你说的那个像小气泡一样的东西可能是肝脏里面的其他非实质细胞，你最好用密度梯度离心来制备细胞。而且你的细胞状态貌似很差，都看不到有细胞连接。劝你换个课题吧
赞一下 回复此楼
吃得苦中苦，也不一定能开上路虎.
2楼2013-04-28 13:49:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lamborghini_

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 芥末香 at 2013-04-28 13:49:37
我也是做原代肝细胞，青春都耗在这上面了。你说的那个像小气泡一样的东西可能是肝脏里面的其他非实质细胞，你最好用密度梯度离心来制备细胞。而且你的细胞状态貌似很差，都看不到有细胞连接。劝你换个课题吧

图片上的细胞状态确实很差，估计都死了。最近一次提的细胞状态还可以，可以看到贴壁。我觉得操作到位了还是可以提到一定活性的细胞的。
只是肝实质细胞是不会增殖的，这一点很悲剧。
我最近觉得那种小泡可能是细胞破碎后的碎片，因为透过显微镜可以看到活细胞里面也会有这种类似的小泡。   也不知道我的猜测对不对....
赞一下 回复此楼
以勤奋为信仰者必成大器
3楼2013-04-28 14:36:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末香

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by lamborghini_ at 2013-04-28 14:36:28
图片上的细胞状态确实很差，估计都死了。最近一次提的细胞状态还可以，可以看到贴壁。我觉得操作到位了还是可以提到一定活性的细胞的。
只是肝实质细胞是不会增殖的，这一点很悲剧。
我最近觉得那种小泡可能是细 ...

我看文献上立体培养20多天后是可以增殖的，做CYP诱导一定要立体培养，单层培养的话很难有好的结果
赞一下 回复此楼
吃得苦中苦，也不一定能开上路虎.
4楼2013-05-01 21:20:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lamborghini_

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 芥末香 at 2013-05-01 21:20:16
我看文献上立体培养20多天后是可以增殖的，做CYP诱导一定要立体培养，单层培养的话很难有好的结果...

恩，谢谢你的建议~~请问你以前做过这方面的实验吗，？  还有，立体培养你在最上面一层是铺什么胶？
赞一下 回复此楼
以勤奋为信仰者必成大器
5楼2013-05-01 22:58:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

芥末香

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1型的鼠尾胶原蛋白，但是效果不好
赞一下 回复此楼
吃得苦中苦，也不一定能开上路虎.
6楼2013-05-03 15:54:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

鱼化石

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
那些小的泡泡，是不是衣原体？
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-15 20:14:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

0640409

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
分离肝细胞时有问题，基本没看到活的原代肝细胞，跟细胞纯不纯没有关系，原代肝细胞铺板4小时后立马就要换液，贴了就活了，没贴就是死的，时间越长越没用
细胞分离后状态不好，就会有很多小泡泡，可能是细胞破了后的，也有可能是细胞密度大，死细胞也贴壁，建议多练练手，把手术操作提高下
赞一下 回复此楼
8楼2013-09-22 15:40:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 lamborghini_ 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 291求调剂 +8 Y-cap 2026-03-29 10/500 2026-03-30 19:31 by Y-cap
[考研] 085601材料工程找调剂 +17 oatmealR 2026-03-29 18/900 2026-03-30 19:21 by Wang200018
[考研] 289求调剂 +16 新时代材料 2026-03-27 16/800 2026-03-30 19:04 by Wang200018
[考研] 328求调剂 +8 嗯滴的基本都 2026-03-27 8/400 2026-03-30 17:20 by Wang200018
[考研] 一志愿华东师范大学有机化学专业，初试351分，复试被刷求调剂! +6 真名有冰 2026-03-29 7/350 2026-03-30 16:36 by herarysara
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +18 leaflight 2026-03-24 18/900 2026-03-30 15:59 by wangjy2002
[考研] 070300化学354求调剂 +7 101次希望 2026-03-28 7/350 2026-03-30 13:22 by Iveryant
[考研] 一志愿211，335分，0856，求调剂院校和导师 +7 倾____萧 2026-03-27 8/400 2026-03-30 09:37 by longlotian
[考研] 356求调剂 +4 gysy?s?a 2026-03-28 4/200 2026-03-29 10:32 by 唐沐儿
[考研] 本科双非材料，跨考一志愿华电085801电气，283求调剂，任何专业都可以 +6 芝士雪baoo 2026-03-28 8/400 2026-03-29 08:16 by 松花缸1201
[考研] 356求调剂 +3 gysy?s?a 2026-03-28 3/150 2026-03-29 00:33 by 544594351
[考研] 求调剂 +7 争取九点睡 2026-03-28 8/400 2026-03-28 21:07 by 争取九点睡
[考研] 283求调剂 +3 A child 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:41 by ms629
[考研] 求调剂 +6 芦lty 2026-03-25 7/350 2026-03-28 13:13 by 唐沐儿
[考研] 299求调剂 +7 嗯嗯嗯嗯2 2026-03-27 7/350 2026-03-28 13:09 by 唐沐儿
[考研] 一志愿郑大085600，310分求调剂 +5 李潇可 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:14 by 不吃魚的貓
[考研] 材料专硕 335 分求调剂 +4 拒绝冷暴力 2026-03-25 4/200 2026-03-25 18:45 by haxia
[考研] 各位老师您好：本人初试372分 +5 jj涌77 2026-03-25 6/300 2026-03-25 14:15 by mapenggao
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭