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对乳酸菌电转化转质粒，转了一个月老是转不进去，求大神们指导！
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问题：构建了两个质粒，第一个质粒一次电转化就转进去了，另一个质粒怎么转都转不进去 电转条件：1、乳酸乳球菌为L.lac.NZ9000,一般是在含2.5%甘氨酸的GM17培养基中养8~9个小 时，待其OD600达到0.2以上时，做成感受态。 2、 感受态一般为100ul或40ul，质粒一般为1ul或者2ul（浓度为~1ug/ul） 3、电压：2.4KV或者2.5KV 脉冲间隔：~5.8ms 4、电转化后的恢复培养基：GM17加适当浓度的蔗糖，MgCl2，Cacl2。 现象：将电转后的恢复培养的菌涂到含氯霉素的GM17的抗性平板，30度静置培养1~2天，甚至3天，什么都不长。 急求解释！万分感谢！ |
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