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yipinyoulan

银虫 (小有名气)

[求助] 对乳酸菌电转化转质粒,转了一个月老是转不进去,求大神们指导!

问题:构建了两个质粒,第一个质粒一次电转化就转进去了,另一个质粒怎么转都转不进去
电转条件:1、乳酸乳球菌为L.lac.NZ9000,一般是在含2.5%甘氨酸的GM17培养基中养8~9个小 时,待其OD600达到0.2以上时,做成感受态。
                 2、 感受态一般为100ul或40ul,质粒一般为1ul或者2ul(浓度为~1ug/ul)
                 3、电压:2.4KV或者2.5KV  脉冲间隔:~5.8ms
                 4、电转化后的恢复培养基:GM17加适当浓度的蔗糖,MgCl2,Cacl2。
现象:将电转后的恢复培养的菌涂到含氯霉素的GM17的抗性平板,30度静置培养1~2天,甚至3天,什么都不长。     

急求解释!万分感谢!
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werty1245

新虫 (初入文坛)

我想问问你,最后你是怎么解决的?我最近一直做电转,总是转不进去
2楼2013-11-14 11:03:28
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werty1245

新虫 (初入文坛)

你最后是怎么解决的?我最近也一直做电转,总是转不进去
3楼2013-11-14 11:04:46
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master_bai

银虫 (小有名气)

可以留个联系方式方式不

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
4楼2014-03-22 03:26:33
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高鹤gao

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by master_bai at 2014-03-22 03:26:33
可以留个联系方式方式不

您好!,您现在还在做乳酸乳球菌的转化吗?
5楼2017-09-18 14:11:16
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海之骄子79

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 高鹤gao at 2017-09-18 14:11:16
您好!,您现在还在做乳酸乳球菌的转化吗?...

你好,最近一直求乳酸乳球菌,已经小半年了,能不能交换菌株啊,真心感谢

发自小木虫IOS客户端
6楼2017-11-07 20:06:41
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1275177062

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by werty1245 at 2013-11-14 11:03:28
我想问问你,最后你是怎么解决的?我最近一直做电转,总是转不进去

我也转不进去

发自小木虫IOS客户端
7楼2018-04-10 10:45:34
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1275177062

新虫 (初入文坛)

楼主,你最后转进去了没有

发自小木虫IOS客户端
8楼2018-04-10 10:47:38
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pys991108

新虫 (初入文坛)

我也想问,楼主,最后咋转进去的,转不进去会和感受态有关么

发自小木虫Android客户端
9楼2018-04-16 12:13:37
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小小孙ss

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 1275177062 at 2018-04-10 10:45:34
我也转不进去
...

我也转不进去

发自小木虫Android客户端
10楼2018-06-14 12:36:25
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