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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 对乳酸菌电转化转质粒，转了一个月老是转不进去，求大神们指导！
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yipinyoulan

银虫 (小有名气)

[求助] 对乳酸菌电转化转质粒，转了一个月老是转不进去，求大神们指导！

问题：构建了两个质粒，第一个质粒一次电转化就转进去了，另一个质粒怎么转都转不进去
电转条件：1、乳酸乳球菌为L.lac.NZ9000,一般是在含2.5%甘氨酸的GM17培养基中养8~9个小 时，待其OD600达到0.2以上时，做成感受态。
                 2、 感受态一般为100ul或40ul，质粒一般为1ul或者2ul（浓度为~1ug/ul）
                 3、电压：2.4KV或者2.5KV  脉冲间隔：~5.8ms
                 4、电转化后的恢复培养基：GM17加适当浓度的蔗糖，MgCl2，Cacl2。
现象：将电转后的恢复培养的菌涂到含氯霉素的GM17的抗性平板，30度静置培养1~2天，甚至3天，什么都不长。     

急求解释！万分感谢！
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1楼 2013-04-09 10:03:48
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werty1245

新虫 (初入文坛)
我想问问你，最后你是怎么解决的？我最近一直做电转，总是转不进去
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2楼2013-11-14 11:03:28
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werty1245

新虫 (初入文坛)
你最后是怎么解决的？我最近也一直做电转，总是转不进去
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3楼2013-11-14 11:04:46
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master_bai

银虫 (小有名气)
可以留个联系方式方式不

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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4楼2014-03-22 03:26:33
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高鹤gao

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by master_bai at 2014-03-22 03:26:33
可以留个联系方式方式不

您好!,您现在还在做乳酸乳球菌的转化吗？
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5楼2017-09-18 14:11:16
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海之骄子79

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 高鹤gao at 2017-09-18 14:11:16
您好!,您现在还在做乳酸乳球菌的转化吗？...

你好，最近一直求乳酸乳球菌，已经小半年了，能不能交换菌株啊，真心感谢

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6楼2017-11-07 20:06:41
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1275177062

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by werty1245 at 2013-11-14 11:03:28
我想问问你，最后你是怎么解决的？我最近一直做电转，总是转不进去

我也转不进去

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7楼2018-04-10 10:45:34
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1275177062

新虫 (初入文坛)
楼主，你最后转进去了没有

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8楼2018-04-10 10:47:38
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pys991108

新虫 (初入文坛)
我也想问，楼主，最后咋转进去的，转不进去会和感受态有关么

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9楼2018-04-16 12:13:37
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小小孙ss

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 1275177062 at 2018-04-10 10:45:34
我也转不进去
...

我也转不进去

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10楼2018-06-14 12:36:25
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