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大勺稀饭

新虫 (小有名气)

[求助] 紧急求助!脂质体包封率不稳定 已有1人参与

已经研二下学期了,课题才刚开始。。。关于脂质体的制备及评价。
我做的药物是水溶性的,用逆向蒸发法做的。
具体过程如下:将蛋黄卵磷脂和胆固醇4:1比例溶于乙醚,加入原料药的磷酸盐缓冲液,超声形成乳剂,转移入茄形瓶中,降压蒸发至形成胶态,加入磷酸盐缓冲液,旋转使瓶壁上的凝胶脱落,减压下继续蒸发,即得脂质体混悬液。
乙醚用量为30ml,pbs10ml,最后水化的pbs为20ml,茄形瓶为500ml的。
之前我的脂类浓度为25mg/ml(磷脂600g,胆固醇150g),旋蒸时真空高一些,蒸的比较快,会起泡,最后瓶底是那种蜂窝状的胶状物质,洗膜时很容易就洗下来了,得到乳白色的混悬液。此时包封率最高能达到60%多。我看了一些资料说旋蒸的时候不能起泡,速度要慢一些,形成均一的薄膜,且最后脂质体混悬液要是泛蓝色乳光的透明装液体。于是我将脂类浓度变小,尝试了15mg/ml,10mg/ml,5mg/ml的,且真空度控制在0.03mMpa左右,旋蒸的很慢,这样倒是基本能形成均匀薄膜,只最后在瓶底有较厚的胶状物质,但是我加pbs洗膜的时候很困难,怎么摇晃振荡都洗不下来,且底部的胶状物质散开,形成一团一团的小块散在pbs液中,就是不溶,于是我又减压蒸发继续旋转,胶状小块开始膨大,起沫,然后才溶解。但是!!!!这样制备的脂质体包封率只有20%左右。
苍天啊,到底是怎么一回事,大家快帮我看看,到底哪里出了问题
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大勺稀饭

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冰激凌的眼泪 at 2013-04-20 08:19:16
我也遇到了相同的情况,请问你现在解决了吗?有的说在最后加入PBS洗膜时候有小泡是磷脂溶解的缘故,但是我也不知道这个说法对不对。我现在还没解决这个问题。

我现在不为这个纠结了,查了药剂书,上面并没有明确要求旋蒸有机试剂的时候必须成膜,这个又不是薄膜法,只是说形成胶状物质,所以,真空度完全可以加大,让它起泡沸腾,这样蒸的也快,最后洗膜的时候也容易,而且洗膜很完全,基本手摇几分钟就可以形成均一的乳液了,这个时候再继续旋蒸除去残留有机试剂,之后关掉真空,水化一定时间就好了。我这样做之后,包封率比较稳定了,不会忽高忽低,而且用显微镜观察了,脂质体形态也挺圆的。
希望能帮到你,大家共同学习
4楼2013-04-20 19:58:45
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大勺稀饭

新虫 (小有名气)

怎么没人理我啊,自己顶!
大家快出来啊,小女子真的很急。。。
2楼2013-04-09 10:32:19
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

我也遇到了相同的情况,请问你现在解决了吗?有的说在最后加入PBS洗膜时候有小泡是磷脂溶解的缘故,但是我也不知道这个说法对不对。我现在还没解决这个问题。
3楼2013-04-20 08:19:16
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冰激凌的眼泪

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 大勺稀饭 at 2013-04-20 19:58:45
我现在不为这个纠结了,查了药剂书,上面并没有明确要求旋蒸有机试剂的时候必须成膜,这个又不是薄膜法,只是说形成胶状物质,所以,真空度完全可以加大,让它起泡沸腾,这样蒸的也快,最后洗膜的时候也容易,而且 ...

原来可以这样啊,等我下回做的时候试试,真是太感谢你啦。
5楼2013-04-20 21:08:06
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