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紧急求助!脂质体包封率不稳定已有1人参与
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已经研二下学期了,课题才刚开始。。。关于脂质体的制备及评价。 我做的药物是水溶性的,用逆向蒸发法做的。 具体过程如下:将蛋黄卵磷脂和胆固醇4:1比例溶于乙醚,加入原料药的磷酸盐缓冲液,超声形成乳剂,转移入茄形瓶中,降压蒸发至形成胶态,加入磷酸盐缓冲液,旋转使瓶壁上的凝胶脱落,减压下继续蒸发,即得脂质体混悬液。 乙醚用量为30ml,pbs10ml,最后水化的pbs为20ml,茄形瓶为500ml的。 之前我的脂类浓度为25mg/ml(磷脂600g,胆固醇150g),旋蒸时真空高一些,蒸的比较快,会起泡,最后瓶底是那种蜂窝状的胶状物质,洗膜时很容易就洗下来了,得到乳白色的混悬液。此时包封率最高能达到60%多。我看了一些资料说旋蒸的时候不能起泡,速度要慢一些,形成均一的薄膜,且最后脂质体混悬液要是泛蓝色乳光的透明装液体。于是我将脂类浓度变小,尝试了15mg/ml,10mg/ml,5mg/ml的,且真空度控制在0.03mMpa左右,旋蒸的很慢,这样倒是基本能形成均匀薄膜,只最后在瓶底有较厚的胶状物质,但是我加pbs洗膜的时候很困难,怎么摇晃振荡都洗不下来,且底部的胶状物质散开,形成一团一团的小块散在pbs液中,就是不溶,于是我又减压蒸发继续旋转,胶状小块开始膨大,起沫,然后才溶解。但是!!!!这样制备的脂质体包封率只有20%左右。 苍天啊,到底是怎么一回事,大家快帮我看看,到底哪里出了问题 |
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