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我晴天一片

新虫 (初入文坛)

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[求助] 基因与载体连接转化后涂版长出了菌，提质粒却没有提出来，不知道什么原因？？

基因与载体PET-28a连接转化后涂板长出了菌，挑单克隆后摇试管提质粒却没有提出来，不知道什么原因？？是连接失败还是怎么回事？连接失败的原因是什么呢？

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1楼 2013-04-07 10:56:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

aeo22

木虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★
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我晴天一片(myprayer代发): 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，鼓励应助，分子生物版块期待你的更多精彩。 2013-04-09 18:02:08
gyesang: 回帖置顶 2013-05-04 19:32:15

你转的感受态是什么菌种啊？
建议你摇完菌先闻一下菌的味道，如果是正常的大肠杆菌会有一股奶香味，如果是有一股让你想吐的恶臭味或者非大肠杆菌的怪味，就扔了吧。。。加溶液2不变澄清也扔了吧（大肠杆菌）。。。
如果抗生素失效，你会得到满板密密麻麻的菌，有质粒没质粒都长。。。
抽不出质粒，要么你抽的过程出问题；要么那个菌没有质粒的，杂菌；要么板上的菌正确，你摇菌培养污染了，摇起来的不是你要的菌，kana也非万能的。。。
要是自连长起来也是携带有质粒啊。。。
还是菌落PCR先鉴定吧