10楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-04-07 21:53:48
没有跑变性电泳，所有有一点降解，并且胶是之前配好的。

新总RNA.jpg
...

11楼: Originally posted by emosgaogao at 2013-04-07 22:55:00
那楼主换下琼脂糖和电泳buffer，再电泳下试试看，同时最好能点上以前已经能跑出条带的阳性对照。我还是觉得楼主的样品出问题的可能性比较大。...

12楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-04-08 11:55:33
唉,关键就是没有呀.....实验室就我一个人做rna,也是刚刚才开始做rna....谢谢了,anyway.
我会去测一下纯度和浓度......

13楼: Originally posted by emosgaogao at 2013-04-08 16:44:40
问隔壁实验室要点样品，楼主从零开始，要有十足的干劲啊，...

8楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-04-07 21:46:33
对呀。。就是做完PCR之后拿出来，上面是浅色近乎于无色的，下面是深蓝色的。说明书说直接上洋，我就用吸头吹匀以后上，然后marker的溴酚蓝会往前跑，样品的不会。。。
用过南京凯基的一步氏RTPCR么...

15楼: Originally posted by XOooZzz at 2013-04-08 22:22:10
感觉是试剂有问题.正常情况下溴酚蓝不应沉淀。
lz做个空白对照，就是把RNA换成水，做一次RT-PCR。如果溴酚蓝还是沉淀，保留该反应物，然后找卖你们试剂的人索赔。
但如果空白对照正常，就是你的RNA含有杂质了。...

16楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-04-08 22:38:00
诶,我做过好多次阴性对照呀,都是沉淀的..
真的假的呀,那好,明天我做一下,然后拍照索赔去....我还天真的以为溴酚蓝沉淀是正常的呢...抑郁啊...国产真的是不行......

17楼: Originally posted by XOooZzz at 2013-04-09 15:05:42
呃，索赔是一方面，另外赶紧找个正常的试剂把自己的实验做了吧。
有这样严重的问题怎么不问问身边的师兄师姐呢？...

18楼: Originally posted by xjtu0025 at 2013-04-09 21:13:50
没有师兄师姐，我今天打电话了，客服说沉淀是正常的。不过答应换一个新的给我。然后我又试了一次，做了一组65度温浴RNA和引物再加东西，一组按照说明书加，另一组阴性对照。。。。没有任何东西。。。。

用过天根 ...

19楼: Originally posted by XOooZzz at 2013-04-09 22:47:42
沉淀绝对是不正常的。
换试剂吧，takara或者promega什么都好。时间是很宝贵的呀，不要浪费在给他们测试产品上。

那个marker就叫50bp marker吗？这个要用高浓度的胶跑。你看看说明书，大约是3%以上？
低浓度的 ...