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runying36

银虫 (正式写手)

[求助] 细胞污染求鉴定

有谁知道这是什么污染?非常小的粒子样的黑点,在细胞间存在,只发现在原处做振动,没有发现迁移性运动。大约在细胞中下之后的两至三天内发现,然后快速覆盖所有地方,不使培养基变黄。
请问有哪位高手知道这是什么污染,我已经被折磨了好久了,换了几乎所有的东西,但还是都没有办法去除。请问怎么能消灭这种污染?
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saintcecilia

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
runying36(myprayer代发): 金币+1, 鼓励应助,分子生物期待你的精彩。 2013-04-05 12:59:09
gyesang: 金币+1, 鼓励发贴交流,为楼主问题解决提供可能的线索! 2013-04-27 21:04:49
黑胶虫?支原体?
我不确定,
但是有一点我可以很肯定的说,
那就是不管是什么污染,
没有能够真正消除的办法,
最好还是重新养
2楼2013-04-05 12:18:35
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emosgaogao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
runying36: 金币+1, ★★★很有帮助, 我是养的原代细胞,现在要补点数据,但是从去年底开始就反复污染,东西都换了但是还是简短的会出现这样的情况,快郁闷死了。 2013-04-05 20:39:45
gyesang: 金币+1, 鼓励应助! 2013-04-06 19:38:01
感觉上来看像是支原体,可以先用抗支原体的药物试一下,当然如果楼主的细胞能很快重复出来,那么还是建议重新培养。
我们实验室也闹过支原体污染,支原体污染并不会太影响细胞的生长,但是能看到明显的可以,同时DAPI染核能看到细胞的核发生类凋亡的不规则细胞核形状。
忍得住诱惑,耐得住寂寞
3楼2013-04-05 16:01:26
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runying36

银虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by emosgaogao at 2013-04-05 16:01:26
感觉上来看像是支原体,可以先用抗支原体的药物试一下,当然如果楼主的细胞能很快重复出来,那么还是建议重新培养。
我们实验室也闹过支原体污染,支原体污染并不会太影响细胞的生长,但是能看到明显的可以,同时D ...

已经重复过很多次了,我也现在实在是想不出从哪里引入的这种污染,已经严重影响了实验进程。不知2楼说的支原体应该怎样对付?
4楼2013-04-05 21:05:23
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emosgaogao

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


runying36(gyesang代发): 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2013-04-27 21:05:10
引用回帖:
4楼: Originally posted by runying36 at 2013-04-05 21:05:23
已经重复过很多次了,我也现在实在是想不出从哪里引入的这种污染,已经严重影响了实验进程。不知2楼说的支原体应该怎样对付?...

我们实验室是用Plasmocin(Invivogen),不过最好还是用检测过没有支原体的细胞系来做实验,我们实验室一些来自病人的细胞没办法才用药物处理,不要期望药物事万能的,所以平时注意无菌操作和购买靠谱的试剂才是王道。下面事生物谷里面的一些关于支原体污染的帖子,还有好多,楼主可以做相关的参考。
http://www.bioon.com/experiment/faq/80857.shtml
http://www.bioon.com/experiment/faq/80858.shtml
忍得住诱惑,耐得住寂寞
5楼2013-04-05 21:44:18
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runying36

银虫 (正式写手)

其实说是为支原体污染,但我还是有一些不解。网上的一些资料说支原体污染外观上看不出来变化,单从培养基的颜色上确实看不出变化,但裸眼看浊度稍比正常时大一点,也不好察觉,可是一放在显微镜下就很清楚的看到那些小颗粒,严重的时候直接看到的就像是沙子埋住了细胞一样。
我现在是原代培养的细胞,可以重新来分离,但是已经反复很多次就是找不到原因,前面几次把一些很明显的因素已经排除,还以为就万事大吉了,中间似乎就没有间断过,只不过这次更加明显了。实在是不知道如何试好了,关键是不知道问题的真正症结所在,简单重复都是徒劳无功!
6楼2013-04-06 09:34:42
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runying36

银虫 (正式写手)

有没有哪位高手能给点实用的建议,俺在此先谢过了!
7楼2013-04-06 09:36:38
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花花贝

金虫 (知名作家)

不用看楼主的DOC,我遇到过,振动的小白点可能是传说中的黑胶虫。最好的方法是复苏一瓶新的细胞。
8楼2013-04-06 13:36:56
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liufang1006

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
黑胶虫污染,可能是细胞的状态不好
风雨无悔人生路!没有吃不了的苦,只有享不了的福!
9楼2013-04-06 21:59:50
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zfm123

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
黑胶虫啊。如果细胞很重要的话,那就试试亚克隆。如果还有种的话,那就重新复吧。
10楼2013-04-07 21:36:00
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