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badi777

铁虫 (初入文坛)


[交流] 噬菌体透射电镜负染照片

环境工程的基础,最近要做噬菌体分离实验,完全是门外汉,步履维艰!
我是从沉积物中分离和纯化微生物和相应的噬菌体。
筛选分离噬菌体后,PTA复染后透射电镜下的照片总不是能够很好滴解释。请教达人给指点一二,不胜感激!
如下图1 和图2 应该是获得的较好的复染照片


然而这样的照片在视野中并不是普遍地现象,普遍出现的是如图3右上角部位大量类似碎片状的形态,但是偶尔观察它们又都有一下球状的表征。见图4


求高人指点一下,这些都是什么,哪些才是我想要的东西!!!!
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蔻拉bear

新虫 (小有名气)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by redbull2011 at 2013-04-03 22:44:41
看上去所有图片中都没有典型的噬菌体结构
那种大片大片的结构,很有可能是噬菌体溶液中的杂质,电镜下的噬菌体不可能有那么高的浓度。样品做电镜前纯化了没有?
楼主现在的问题是样品中噬菌体的浓度太低和纯化问题 ...

您好,我现在要做噬菌体的电镜观察。我已经把噬菌斑纯化了5次,想咨询您我的噬菌斑现在在平板上,我想要电镜观察的话需要怎么处理一下呢?谢谢
9楼2018-11-12 15:45:16
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ycczy111

金虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我怎么感觉图一二不像是噬菌体    形态不规则啊
2楼2013-04-03 17:47:21
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badi777

铁虫 (初入文坛)


引用回帖:
2楼: Originally posted by ycczy111 at 2013-04-03 17:47:21
我怎么感觉图一二不像是噬菌体    形态不规则啊

那图4里面的东西呢?我从环境中富集分离,也不知道它们长什么样子。图4里面的东西怎么解释
3楼2013-04-03 19:19:55
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dorecnu

木虫 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
问题的关键不在电镜照片上,我觉得噬菌体的分离是最关键的一步。
分离噬菌体可以用双层平板法,见到噬菌斑后将噬菌体扩大培养,再用透射电镜观察,一般可获得清晰的图片
基于以下的几点我认为楼主观察的样品非噬菌体:1.没有头尾结构;2.不像覆盖层科的病毒有明显的荚膜结构;3.不同视野看到的噬菌体形态不一样。
4楼2013-04-03 20:28:38
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