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cherishjy

木虫 (小有名气)

[求助] MTS测细胞活力

求MTS测细胞活力的数据如何处理啊？我做了加细胞加药的实验组，加细胞不加药的对照，以及没有细胞没有药的空白三组，用MTS测的细胞活力，数据处理是否跟MTT相同啊？为什么实验组490nm测出来的数据比不加细胞的空白还低啊？求指教啊！
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1楼 2013-04-02 13:04:43
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Angiezhh

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+5, 应助指数-1, 首贴奖励，不过回答does not make sense 2013-04-04 08:05:40
加了药的本来就低啊，说明你的药有作用啊。推荐你用CCK8试剂盒毒性小，比较方便。我们实验室就用这个
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2楼2013-04-03 10:46:08
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cherishjy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Angiezhh at 2013-04-03 10:46:08
加了药的本来就低啊，说明你的药有作用啊。推荐你用CCK8试剂盒毒性小，比较方便。我们实验室就用这个

空白是不加细胞不加药的那组啊，用来矫正实验数据的，
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3楼2013-04-03 19:17:28
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cucu奶茶

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

调整一下孵育时间看看。
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4楼2013-04-22 14:55:39
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cherishjy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cucu奶茶 at 2013-04-22 14:55:39
调整一下孵育时间看看。

嗯，我现在也这么觉得
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5楼2013-04-23 08:48:06
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

楼主提问的问题不具体。

1。 不加细胞不加药  吸光值多少？
      各个实验组的   吸光值多少？

如果都很低，例如 0.15 附近，说明，你的药效和背景值接近。

2. 各个孔有什么异常？
A。例如是不是空白组的 变浑浊或 变红了？
也可能导致其吸光值增加。
B. 你的细胞产生了紫色结晶没有？
要是没有，说明细胞被你养死了。

3. MTT等试剂是可以同培养基空白反应的，这主要是发生在DMSO溶解的环节。
要是你的培养孔里面有过多的残留培养基，在DMSO溶解fomazan的时候，也会增加其吸光值。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
6楼2013-04-23 10:02:11
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cherishjy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by HarveyWang at 2013-04-23 10:02:11
楼主提问的问题不具体。

1。 不加细胞不加药  吸光值多少？
      各个实验组的   吸光值多少？

如果都很低，例如 0.15 附近，说明，你的药效和背景值接近。

2. 各个孔有什么异常？
A。例如是不是空白组 ...

1、加药组吸光值在1.4左右，对照组吸光值在1.5左右，而空白就是没有细胞那组的吸光值在1.6左右了；
2、做MTS产生的结晶颜色很深，比我之前做MTT的颜色深好多，肉眼看上去都已经紫的发深褐色那种了；
3、我做了空白组，就是空白组的吸光值比实验组大了；
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7楼2013-04-23 12:29:23
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by cherishjy at 2013-04-23 12:29:23
1、加药组吸光值在1.4左右，对照组吸光值在1.5左右，而空白就是没有细胞那组的吸光值在1.6左右了；
2、做MTS产生的结晶颜色很深，比我之前做MTT的颜色深好多，肉眼看上去都已经紫的发深褐色那种了；
3、我做了空 ...

明显， MTS测定 空白组都这么高，说明培养基本身把该物质还原的很厉害。
你还是先把空白的吸光值降下来。。为啥不试试MTT？ 这么成熟的方法。

再加细胞培养，就测不了。
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
8楼2013-04-23 12:51:23
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HarveyWang

捐助贵宾 (知名作家)

海外行者

【答案】应助回帖

另外， 楼主你有没有 550nm附近的滤光片啊？！
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【我一直认为做土匪很性感很坏，很直接，可以大声喊：JCMM我爱你！所以，我自从博士毕业后，就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
9楼2013-04-23 12:52:43
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cherishjy

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by HarveyWang at 2013-04-23 12:51:23
明显， MTS测定 空白组都这么高，说明培养基本身把该物质还原的很厉害。
你还是先把空白的吸光值降下来。。为啥不试试MTT？ 这么成熟的方法。

再加细胞培养，就测不了。...

我用的是promega MTS one solution 试剂盒，本想减少步骤减少误差的，结果就悲剧了，我觉得是我孵育时间太长的原因，还有你要的东西我没有哦，不好意思
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10楼2013-04-23 15:20:44
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