24小时热门版块排行榜    

查看: 885  |  回复: 7

babyface121

铁虫 (小有名气)

[求助] western显影十个浓度只显出来前四个!有图有真相!求助啊!

跑western时共有九个浓度,但是只有前四个样显影显出来了,后面的都没有显出来,显出来的条带也很不均匀,下面的是另外一个样,只显出了后面四个浓度,显出来的,有的两边粗中间细得几乎看不见了,是什么原因呢

IMAG0486.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

babyface121

铁虫 (小有名气)

自已顶啊顶!
2楼2013-04-01 20:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的上样量是多少?你的内参出来没有?
从你的图来看的话,可能是发光液浇的不均一或一抗二抗孵育摇动不均等啦 原因诸多。。。。
生物化学与分子生物学
3楼2013-04-02 08:40:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ourlab

捐助贵宾 (正式写手)

生命科学博士

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
babyface121(gyesang代发): 金币+2, 鼓励发贴交流,为楼主问题解决提供可能的线索! 2013-04-27 21:08:09
将膜做立春红染色,检测蛋白分布是否均匀。
如果均匀,则可能是显影问题。显影问题举例: ECL在膜上存留太多,液体过多部分的HRP被过快地在几分钟内灭活。
如果不均匀,则可能是转印问题。例如使用半干转印,平面电极和三明治接触不好,造成局部转印效率低。
上传立春红染色后,可再帮你分析。
4楼2013-04-03 10:33:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

babyface121

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lidonghong at 2013-04-02 08:40:03
你的上样量是多少?你的内参出来没有?
从你的图来看的话,可能是发光液浇的不均一或一抗二抗孵育摇动不均等啦 原因诸多。。。。

上样量30ug,这就是内参,我都是在皿里敷的一抗二抗AB液,不知道怎么回事,内参都跑不出来
5楼2013-04-05 21:17:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

babyface121

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by ourlab at 2013-04-03 10:33:42
将膜做立春红染色,检测蛋白分布是否均匀。
如果均匀,则可能是显影问题。显影问题举例: ECL在膜上存留太多,液体过多部分的HRP被过快地在几分钟内灭活。
如果不均匀,则可能是转印问题。例如使用半干转印,平面电 ...

好的,谢谢,我只考染后转膜后的胶,不太均匀~
6楼2013-04-05 21:18:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zuifengyang

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

转膜的问题,低电流转的时间长点可能能解决问题。
7楼2013-04-06 07:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lidonghong

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by babyface121 at 2013-04-05 21:17:08
上样量30ug,这就是内参,我都是在皿里敷的一抗二抗AB液,不知道怎么回事,内参都跑不出来...

可能是实验方法的问题,好好在仔细做一次。。。按照实验室惯有的方法做。。。
生物化学与分子生物学
8楼2013-04-07 09:51:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 babyface121 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +4 西山十月 2026-08-09 6/300 2026-08-10 00:16 by liufeng0619
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +7 Lanmanbaby 2026-08-09 14/700 2026-08-09 23:33 by Tide man
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +10 布布和一二 2026-08-08 21/1050 2026-08-09 17:21 by 天神眷顾
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的?有收到消息的吗? +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见