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tianjietian木虫 (小有名气)
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[交流]
请教:用葡聚糖凝胶G-50测包封率需要怎样处理?
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| 我做的顺铂固体脂质纳米粒,想用葡聚糖凝胶(Sephadex)-G50,不知应该如何预处理?文献查到的是用蒸馏水浸泡12小时,不知道是否普遍适用?还有我的制剂是磁性SLN,磁性物质四氧化三铁是否对胶体有吸附作用,影响实验结果呢?希望有经验的虫子多给指点啊。 |
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tianjietian
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2楼2007-09-09 15:46:06
3楼2007-09-12 14:39:51
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使用方法: 1。乙醇浸泡: 在室温下,将干粉浸泡于50-60%乙醇中至少24小时,并不断搅拌以保证凝胶溶涨,永无盐水洗去残存的乙醇后滤干; 2. 无盐水浸泡: 室温下,在无盐水中充分溶涨24小时,间隙搅拌,以保证凝胶的完全溶涨,然后; 3. 盐酸浸泡: 在常温下再用0.2NHCL浸泡12小时,间隙搅拌,滤干,水洗至中性; 4. 将溶涨后的凝胶脱气后(真空抽滤或超声波)根据装柱要求一次性均匀置入柱内,注意保证湿态装柱,并避免柱内产生气泡和断层; 5. 上样前平衡层析柱至少3-5个体积直到记录仪基线变得平稳为止。 6. 凝胶过滤的上样量一般为5%的床体积,柱高的选择也与分离要求相关,柱高控制在40-50 cm以下,脱盐时高径比为5:1即可。 7. 洗脱方法: 可以用无盐水,也可用上柱时的缓冲液洗脱;在上柱Buffer中加入NaCL等度洗脱或盐梯度洗脱也可以完成分离纯化。 打得累死了,网上有很多有关Sephadex G 系列的处理方法,自己搜下就有了。 一般游离药物(磁性物质四氧化三铁)被凝胶吸附而后出柱,制剂颗粒先出来,关键是要避免制剂也被凝胶颗粒吸附,不过这点也可以先用空白制剂(SLN)预饱和下柱子,再上样载药制剂可以解决。 |
4楼2007-09-14 20:29:04
tianjietian
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5楼2007-09-15 09:53:44
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不过我的游离药物不是磁性四氧化三铁啊,空白制剂才是磁性固体脂质纳米粒(MSLN)。