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liusiapril

木虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by philoshyren at 2013-04-02 10:20:42
1.封闭不好
2.一抗浓度大
3.上样量高
4.二抗浓度大
5.发光底物比较敏感，可以用一些国产的效价低一点的

额，我觉得五条里面我占了三条。如果我仅仅把蛋白量调高，一抗二抗降低到原先水平ok吗？蛋白量太低一直做不出来。

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11楼2013-04-02 13:38:41
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烟大考研

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
liusiapril: 金币+1 2013-04-03 00:08:08
这个问题我也曾经出现过，我当时的解决办法是隔孔点样，
我出现的问题是临孔的大分子蛋白被小分子蛋白带跑了
分析原因可能是临孔的蛋白在电泳时有相互的作用，这个与电泳中的条件可能有一定的关系
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心信其可行，则移山填海之难，终有成功之日；心信其不可行，则反掌折枝之易，亦无收效之期
12楼2013-04-02 23:10:30
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liusiapril

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 烟大考研 at 2013-04-02 23:10:30
这个问题我也曾经出现过，我当时的解决办法是隔孔点样，
我出现的问题是临孔的大分子蛋白被小分子蛋白带跑了
分析原因可能是临孔的蛋白在电泳时有相互的作用，这个与电泳中的条件可能有一定的关系

以前也都是用相同的蛋白样品来跑，就这次蛋白上样量大了些出现了这种问题。隔空点的话做出来的图就不能是一张完整的图片了…

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13楼2013-04-03 00:07:42
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liusiapril

木虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 烟大考研 at 2013-04-02 23:10:30
这个问题我也曾经出现过，我当时的解决办法是隔孔点样，
我出现的问题是临孔的大分子蛋白被小分子蛋白带跑了
分析原因可能是临孔的蛋白在电泳时有相互的作用，这个与电泳中的条件可能有一定的关系

请教还有什么好的办法没，多谢~

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14楼2013-04-03 00:09:02
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philoshyren

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
11楼: Originally posted by liusiapril at 2013-04-02 13:38:41
额，我觉得五条里面我占了三条。如果我仅仅把蛋白量调高，一抗二抗降低到原先水平ok吗？蛋白量太低一直做不出来。
...

试试看，自己的条件都是自己优化出来的
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15楼2013-04-04 11:48:43
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nicknelson

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

tris pH值不准。自己配的话，好好配。买的话应该没啥问题。
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16楼2013-04-04 17:25:28
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liusiapril

木虫 (小有名气)
引用回帖:
16楼: Originally posted by nicknelson at 2013-04-04 17:25:28
tris pH值不准。自己配的话，好好配。买的话应该没啥问题。

额…这个理由我觉得说不通。我的TBS溶液都是配好的10×的。一直用相同的母液稀释，以前都没有问题，这次怎么会有问题了呢？

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17楼2013-04-04 22:12:32
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liusiapril

木虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by philoshyren at 2013-04-04 11:48:43
试试看，自己的条件都是自己优化出来的...

嗯，只能继续试了，谢谢。为什么总是不能给你发金币呢？

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18楼2013-04-04 22:15:57
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philoshyren

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
18楼: Originally posted by liusiapril at 2013-04-04 22:15:57
嗯，只能继续试了，谢谢。为什么总是不能给你发金币呢？
...

呵呵 无所谓啦，我也不常来小木虫。能帮助到你我很高兴，这帖子还能向师弟师妹小得瑟一下 哈哈
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19楼2013-04-05 16:55:13
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liusiapril

木虫 (小有名气)
引用回帖:
19楼: Originally posted by philoshyren at 2013-04-05 16:55:13
呵呵 无所谓啦，我也不常来小木虫。能帮助到你我很高兴，这帖子还能向师弟师妹小得瑟一下 哈哈...

哈哈，好吧~

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20楼2013-04-06 00:13:51
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