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失踪的夏天木虫 (正式写手)
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细胞加入病毒感染时，为什么要在2小时后弃去病毒液？
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最近做抗病毒很不顺，细胞都被病毒弄死了，100TCID50已经降到12.5TCID50了，细胞还是死。 仔细看文献，说加入病毒后，放置培养箱里2小时后再弃去病毒液，PBS洗涤，再加入药物。 但老师说完全可以不用弃去，省去这一步。说2小时病毒已经侵入细胞，弃去也无意义。如果是这样，那为嘛文献里都要弃去呢？ 现在细胞一加病毒就死，指标一个都没测。急啊急啊，有木有高人指点下啊。 貌似这样下去毕业不了啊。。。。。。 |
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失踪的夏天
木虫 (正式写手)
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rabbitzumi
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你先做一下病毒不同稀释度（从100TCID50开始，可以5倍或10倍向下稀释）对产生CPE的影响。因为每一批病毒的TCID50值都是不准的，而且每次做实验时的细胞状态也不同，之前一定要做预实验，把病毒量调好。 此外，经典的病毒技术手册上面貌似也是病毒吸附1-2h再洗去病毒后给药，此时已有部分药物吸附并进入宿主细胞，这样做的原因可能有： 1. 这种给药方式反映的药物作用特点是对病毒吸附后的环节发挥抑制作用，如脱衣壳，病毒基因组复制，转录，翻译，出芽，释放等等等环节。 2. 个人认为这样做更接近于病毒感染的真实过程，一般的宿主都是在病毒环境中暴露一定时间（这个时间足以使其被感染），而不是一直处于病毒环境中。 我做过比较，病毒吸附与不吸附两种造成的CPE差不多，后者稍严重。 |
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