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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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morningwind

木虫 (著名写手)

[求助] 蛋白质提取的怪现象

我提取一种水果中的蛋白质,用了两种方法:1、丙酮+果实打浆,离心后溶解在ph7.4的缓冲液中,用硫酸铵沉淀(80%),在冰箱中放置一晚上后,溶液分层上部分变成了凝胶状,有点像果冻,下部分没有沉淀 2、果实+ph7.4的缓冲液+sds+pvpp打浆,放置一晚上,溶液分层,上半部分形成悬浮液,好像泥土悬浮在里面,轻轻搅动就会分散,下半部分澄清。这是怎么回事?如果第一种方法不用硫酸铵沉淀,而是丙酮粉溶解在缓冲液中,置于冰箱一晚,发现成了果冻一样的东西,但是比较稀。

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xsfh

木虫 (小有名气)

ph=7.4是否是这种蛋白的等电点?应该在等电点,效果好. 是否蛋白浓度太小!
2楼2007-09-03 16:41:03
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laijikl

木虫 (正式写手)

看来里面有杂志没除去,不知道用丙酮粉溶解在缓冲液,能否完全溶解?
一般情况下,硫酸铵沉淀(80%),都能将相应的蛋白沉淀下来,还可能是硫酸铵的量没加够。
而且,用硫酸铵沉淀法时,一般是分级沉淀,不要一次就用这么大的浓度,应该慢慢来,逐渐加大浓度,查查相关的资料吧
nopainsnogains
3楼2007-09-03 19:26:46
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