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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » MTT粉末称取时用避光吗？
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阿飞1990乖乖

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amisking: 金币+5, MolEPI+1, 鼓励积极发帖帮助解答问题。 2013-03-20 20:28:14
yq19880610: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-03-21 08:33:54
正好明天我也要配制MTT，今天刚找的资料，希望对你有帮助
MTT 溶液的配制 通常MTT 配成的终浓度为5mg/ml,须用PBS或生理盐水做溶剂。市面上一般MTT的包装为100mg,250mg或1g
1、对于100mg这样的小包装，厂家都是将MTT放入小管中的，个人建议不要再用天平称量分装，而应该一次性将其全配制成溶液，如100mg用20mlPBS来溶解。 具休做法：预先在50ml离心管(没有的话，可用培养瓶替代)加入20ml PBS，从中先吸取500-1000ul PBS装入含MTT的小管中，吹打若干次后将其移入50ml离心管，然后再混匀。可以重复几次，以使小管中的MTT不残留于管内。将MTT完全混匀后，用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌，分装避光(避光袋或是黑纸、锡箔纸包住)可长期保存于-20度。按细胞培养板每孔需加10ul计算，一般每96孔板约需1ml，所以分装时可考虑每管分装1ml。
2、对于大包装，可按上述方法称取一部分溶解，也有人将粉剂分装在EP管里，用的时候现配，直接往培养板中加。
   注意事项：
1、在配制和保存的过程中，容器最好用铝箔纸包住。
2、配成的MTT需要无菌，MTT对菌很敏感
3、MTT一般最好现用现配，过滤后4度避光保存两周内(个人曾做过4度避光保存4周的MTT溶液，效果仍然不错)有效，或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存，避免反复冻融，最好小剂量分装，用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用。
4、MTT有致癌性，用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.
赞一下(2人) 回复此楼
物来顺应，未来不迎，当时不杂，既过不恋。
3楼2013-03-20 20:23:47
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