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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 光谱分析 » 荧光分光光度计怎么定量分析
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linkaiglk

金虫 (著名写手)

[交流] 荧光分光光度计怎么定量分析

实验室使用的F-7000荧光分光光度计，但是不知道怎么使用荧光分光光度计进行物质的定量分析，希望各位虫友们能帮忙解释一下，最好再举一个实例。拜谢各位了！

[ Last edited by crity328 on 2013-3-20 at 09:04 ]
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1楼 2013-03-19 22:17:27
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dx109

铁杆木虫 (著名写手)
★
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找到你要分析的目标物的标准品，然后配制成一系列的标准溶液，先做校正曲线，然后测定你的溶液
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2楼2013-03-20 08:35:47
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linkaiglk

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by dx109 at 2013-03-20 08:35:47
找到你要分析的目标物的标准品，然后配制成一系列的标准溶液，先做校正曲线，然后测定你的溶液

要是没有标准样呢？
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3楼2013-03-20 13:47:00
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dx109

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果没有标准样品，一般的纯品（CP,AR）可以当着标样来用；如果连这个都没有，那就没办法定量了（我个人是没见过不做校准曲线定量的）
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4楼2013-03-20 23:59:32
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不爱吃蔬菜菜

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
没有标准品 怎么做标准曲线啊 买个呗
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5楼2013-03-21 08:10:51
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linkaiglk

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by dx109 at 2013-03-20 23:59:32
如果没有标准样品，一般的纯品（CP,AR）可以当着标样来用；如果连这个都没有，那就没办法定量了（我个人是没见过不做校准曲线定量的）

就是实验提取的一种荧光小肽，但是还不能特别纯化，想定量这种荧光小肽的量，所以不知道怎么测
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7楼2013-03-21 14:15:13
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queen3511

铜虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
如果荧光是人为加上去的，那荧光物质可以作为标准来定量的啊
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8楼2013-03-22 09:46:13
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dearyangcong

金虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
linkaiglk: 金币+5 2013-03-22 10:57:18
跟紫外分光光度计差不多的。只不过检测的是荧光。可以买成熟的试剂盒。比如promega有维生素的定量试剂盒。细菌的定量试剂盒等等。通常就是在容器里（ep管。96孔板。比色皿什么的）试剂，待测物1:1混匀，五分钟后（不同试剂盒不一样）测荧光。一般要注意待测物无菌处理且不要加表面活性剂

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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9楼2013-03-22 10:47:28
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linkaiglk

金虫 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dearyangcong at 2013-03-22 10:47:28
跟紫外分光光度计差不多的。只不过检测的是荧光。可以买成熟的试剂盒。比如promega有维生素的定量试剂盒。细菌的定量试剂盒等等。通常就是在容器里（ep管。96孔板。比色皿什么的）试剂，待测物1:1混匀，五分钟后（不 ...

师哥，问个问题哈，就是我得到的物质是一种微生物产的荧光小肽，现阶段还没有得到纯品，但是想测这种荧光小肽的含量，有这种测量荧光小肽的试剂盒吗？这种试剂盒上哪里能查到呢？
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10楼2013-03-22 10:59:21
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dearyangcong

金虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
10楼: Originally posted by linkaiglk at 2013-03-22 10:59:21
师哥，问个问题哈，就是我得到的物质是一种微生物产的荧光小肽，现阶段还没有得到纯品，但是想测这种荧光小肽的含量，有这种测量荧光小肽的试剂盒吗？这种试剂盒上哪里能查到呢？...

不好意思，之前没看到，你可以向卖这种试剂盒的供应商咨询。如果没有，你也可以自己建立方法，你可以查一下这种建立方法的文献很多，首先你需要确认一下在哪个浓度范围下荧光和含量是成线性的。

提醒你一下，你这个检测需要先灭菌，且在灭菌的同时不能破坏该物质的结构。因为细菌会干扰荧光检测的结果。
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11楼2013-03-29 15:01:27
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zhenwuhuang6楼
2013-03-21 08:24   回复  
祝福
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