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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 电泳检测RNA完整性
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小小_木虫

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

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感谢参与，应助指数 +1
ckk1987: 金币+1 2013-03-22 08:41:59
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5楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-03-21 08:17:13
你点样、跑电泳是在专门的实验室进行的吗？请问你电泳装置一般是怎么前处理的？...

我提的是细菌的总RNA，我们跑电泳就是普通的琼脂糖凝胶，配制胶和缓冲液的水是DEPC处理过的，槽子和梳子都没有处理，跑快点没有问题的。主要还是RNA在提取过程中多注意些，选适合的试剂盒，操作快些，步骤简单
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11楼2013-03-21 20:39:51
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xiaoweiwei121

荣誉版主 (文坛精英)

这潭水蓝的深邃

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ckk1987: 金币+1 2013-03-22 08:42:11
gyesang: 金币+2, 言之有理，欢迎常来做客！ 2013-03-22 12:41:21
就跑个电泳检测一下RNA 哪用得着那么麻烦
电泳槽洗干净，新配的电泳液
然后电压高点 15-20分钟拿出来检测
没问题，至少对我来说没什么任何问题
什么depc水，配电泳液，配胶，甲醛。。。。这不是找罪受吗
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12楼2013-03-22 05:45:43
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chnfhjxl

金虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-03-21 15:09:58
我跑的是琼脂糖凝胶电泳！...

跑RNA就应该跑甲醛变形电泳。因为琼脂糖的不能保证mRNA没有降解或者解链的啊，我看过的文章里RNA 都是用甲醛变形电泳跑的。我们平时都跑琼脂糖，但是大的实验室里，电泳仪混用，很可能有RNA酶的降解，导致RNA 跑不好。如果只能跑琼脂糖的话，那就配置RNA 专用的所有东西吧。不要和大家混着做。版里有很多，搜索RNA电泳看看大家的经验吧。祝你成功
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13楼2013-03-22 09:10:24
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qapollo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-03-21 15:12:36
好弄吗？我都提了快一个月了,还是不能保证每次结果都好!我18号上午提了一次，效果还行，差不多有三条带，但重现性太差了，这几天题效果又不好了！我做的是从器脏提取中提RNA，你有什么经验传授传授，感激不尽！...

每次提RNA的时候我都是按照说明书上的步骤做的，我觉得说明说上有的东西应该不会出问题。你需要用液氮研磨组织吧？研磨的效果好不好也会影响提取效果。
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14楼2013-03-22 09:41:23
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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15楼2013-03-22 11:15:10
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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16楼2013-03-22 11:16:00
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qapollo

金虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by ckk1987 at 2013-03-22 11:15:10
恩，我就是用液氮研磨，完全磨成很细很细的粉末！...

你考虑过换个试剂盒么？
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17楼2013-03-22 12:22:30
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ckk1987

禁虫 (正式写手)
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18楼2013-03-22 12:36:29
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