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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » HPLC测血浆中某药物浓度，加入内标物的目的是什么？
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饺子813

铜虫 (小有名气)

[交流] HPLC测血浆中某药物浓度，加入内标物的目的是什么？ 已有1人参与

书上说：
“在样品前处理（如浓缩、萃取，衍生化等）前加入内标物，然后再进行前处理时，可部分补偿欲测组分在样品前处理时的损失”
这句话应该怎么理解？内标在测定中起了什么作用
另外还想请教，从图谱上得出各个浓度标准样品和内标的面积之后再怎么做才能得出标准曲线？我看分析课本上的公式很复杂，好像还有校正因子什么的，不明白到底怎么做。
恳请大家指点！
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1楼 2013-03-18 22:30:53
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ufoking

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
在内标法中，必须要有待测组分和内标物的标准品（均为已知浓度），进样后得到在已知浓度下两种组分在此基质下的峰面积。
设待测组分的浓度为C1，对应的峰面积为A1；内标物的浓度为C2，对应的峰面积为A2；
A1/A2=C1/C2×f，可以计算得到校正因子f，当然理论情况下在此基质中f值是一定的，因此据此可做标准曲线
以峰面积之比为纵坐标，浓度之比为横坐标（通过内标物浓度变化来调节），可以得到线性直线，理论上该直线的斜率即为f
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饺子813
3楼2013-03-18 23:22:13
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ufoking

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
通过比较内标物处理前后的量可以得出在处理过程中的损失量，间接得出待测物在此处理过程中的损失量
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2楼2013-03-18 22:47:54
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饺子813

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by ufoking at 2013-03-18 23:22:13
在内标法中，必须要有待测组分和内标物的标准品（均为已知浓度），进样后得到在已知浓度下两种组分在此基质下的峰面积。
设待测组分的浓度为C1，对应的峰面积为A1；内标物的浓度为C2，对应的峰面积为A2；
A1/A2=C ...

明白了！太谢谢你啦！
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4楼2013-03-19 12:08:30
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