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咕咚不动

金虫 (小有名气)

[求助] 求问waters的Symmetry C18反相柱第一次使用需要用什么溶剂活化润湿的一些问题呢

最近买了一根waters的Symmetry C18反相柱,求问第一次使用时是不是需要使用甲醇和乙腈进行冲洗?步骤是怎么样的?还有说明书里面提到这根柱子需要使用乙腈进行保存,所以也想问问大家能不能用甲醇替代呢?因为实验中没有用到乙腈,不然每次还抽滤乙腈太麻烦了!谢谢各位了!
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guanghb5

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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咕咚不动: 金币+7, ★★★很有帮助 2013-03-18 09:22:33
首先,是配制好65%的乙腈/水,再把色谱柱正确的连接在色谱仪上,出口放空(注意:出口端切不可连上检测器,以免污染了检测器),以低流速0.1ml/min~0.5ml/min(如果是LC/MC柱子,则应以0.3ml/min进行)均可,不可以高流速进行,等看见柱子出口有液体流出后,过20分钟后再接上检测器,以循序渐进的方法将流速调至1.0ml/min(如果是LC/MC柱子则应以0.3ml/min进行),继续冲洗2~8小时。
关于柱子保存:做完样品之后可直接用55%~65%乙腈/水或者用55%~65%甲醇/水冲洗色谱柱40~80分钟,然后以纯甲醇或乙腈冲洗30分钟,即可保存。所以,你用甲醇也是可以的。
4楼2013-03-18 08:55:35
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fujinguo06

木虫 (著名写手)

这个你不直接问Waters公司的技术人员更清楚吗?
2楼2013-03-18 08:42:54
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鸭绿江畔

铁杆木虫 (著名写手)

牛B

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
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咕咚不动: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-18 09:21:19
色谱柱第一次使用,都是用乙腈冲洗,至于洗多少个保留体积,通常是20个。然后再逐步更换到你所用的流动相系统。封存色谱柱时用乙腈的原因是,对柱子的损伤比甲醇小。因为甲醇是质子化试剂,也就是说可以给出质子。也就是说相比于乙腈,甲醇的酸性更强。反向柱因为是把18烷基通过化学反应结合到硅胶上,在酸性环境下不稳定。
我那么努力,就是为了在更高的层次遇见你!
3楼2013-03-18 08:49:52
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330532119

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
咕咚不动: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-18 09:22:25
用乙腈0.5ML每分钟.  个把小时稳定就行了就行了.一般出厂人家都外理过的.记住柱子出口不要接流通池
5楼2013-03-18 08:57:39
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