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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 超速离心时温度
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echo_hugh

银虫 (初入文坛)

[求助] 超速离心时温度

实验室的冷冻超速离心机可能出现了密封问题，导致抽真空时一直停留在>200的阶段。温度因此也无法降下去。做了个测试，45000rpm，4度设定时，当转速平衡的时候，即到达45000rpm时，温度滞留在9.6度。问，这样的温度对纯化蛋白有影响么？以为有问题，可是其他人都没有关心这件事情，难道是蛋白在这个温度阶段是不会变性的？还是因为他们只看到了最后停止的温度（P.S. 当停转时，温度会继续下降，所以他们过来取蛋白的时候只看到5度6度的样子）。不明白，应不应该继续做啊？
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1楼 2013-03-15 18:34:32
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-03-26 22:56:32
能维持在10度以下我觉得对于蛋白纯化没什么影响，超速离心维持低温主要是为了防止过热造成蛋白变性
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2013-03-15 21:46:49
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普通回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
对蛋白肯定有一定影响。要看你下面要用这些样品做什么实验。
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3楼2013-03-16 00:57:17
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echo_hugh

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-16 00:57:17
对蛋白肯定有一定影响。要看你下面要用这些样品做什么实验。

做结晶啊。。
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4楼2013-03-26 21:20:38
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echo_hugh

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by starseacow at 2013-03-15 21:46:49
能维持在10度以下我觉得对于蛋白纯化没什么影响，超速离心维持低温主要是为了防止过热造成蛋白变性

也有人这么说。。但是他们都没注意到，离心过程中都升温到10度左右了。。我已经跟负责人说了，他说他们去修
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5楼2013-03-26 21:21:45
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by echo_hugh at 2013-03-26 21:20:38
做结晶啊。。...

蛋白的热稳定性不一样，先查查看你做的蛋白也许热稳定性好。一般来说，控制温度还是挺重要的。
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6楼2013-03-27 06:45:57
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bloodwar

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感觉还是不保险，低温安全点
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7楼2013-03-27 10:29:28
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echo_hugh

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-03-27 06:45:57
蛋白的热稳定性不一样，先查查看你做的蛋白也许热稳定性好。一般来说，控制温度还是挺重要的。...

一点都不好，做了gel filtration发现全变成void volume 了。。。欲哭无泪啊。。
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8楼2013-03-27 18:13:47
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echo_hugh

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by bloodwar at 2013-03-27 10:29:28
感觉还是不保险，低温安全点

系的。。还好他们已经在修了。。beckmann的也不经使啊。。。
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9楼2013-03-27 18:14:58
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dearzhanglei

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可以继续，有条件的话加点蛋白酶抑制剂，温度的话只要在十度以下就没多大问题！
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10楼2013-03-27 18:30:43
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