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wzgirl2011

铜虫 (初入文坛)

[求助] WB求指教

最近一直在做WB,发现有一个目的蛋白曝光后总是有很多杂带,杂带也挺清晰的,另外内参做出来每次都是很厚,很亮,我做的是骨骼肌组织,不知道什么原因哎,求高人指教
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-15 06:03:49
杂带多可能是一抗本身不是很特异,这也是没有办法的事情,只要在目的条带附近没有杂带就可以了。至于内参信号太强,你可以少上样或者增加一抗的稀释倍数。
3楼2013-03-15 00:12:24
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robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析,欢迎交流 2013-03-15 06:03:40
several suggestions:
1. maybe you need load less sample,
2, overnight blocking
3, optimize the dilution of your primary antibody and secondary antibody
immunologyparasite
2楼2013-03-14 21:21:15
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