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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » WB求指教
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wzgirl2011

铜虫 (初入文坛)

[求助] WB求指教

最近一直在做WB，发现有一个目的蛋白曝光后总是有很多杂带，杂带也挺清晰的，另外内参做出来每次都是很厚，很亮，我做的是骨骼肌组织，不知道什么原因哎，求高人指教
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1楼 2013-03-14 21:15:19
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robustli

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+2, 谢谢分析，欢迎交流 2013-03-15 06:03:40
several suggestions:
1. maybe you need load less sample,
2, overnight blocking
3, optimize the dilution of your primary antibody and secondary antibody
赞一下 回复此楼
immunologyparasite
2楼2013-03-14 21:21:15
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+1, 谢谢参与 2013-03-15 06:03:49
杂带多可能是一抗本身不是很特异，这也是没有办法的事情，只要在目的条带附近没有杂带就可以了。至于内参信号太强，你可以少上样或者增加一抗的稀释倍数。
赞一下 回复此楼
3楼2013-03-15 00:12:24
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