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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCV的感染性克隆载体构建
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bbq378

铁虫 (初入文坛)

[求助] PCV的感染性克隆载体构建

求大家解疑
    在PCV2的感染性克隆载体的构建中，为什么要先分段扩增圆环的全基因，然后在用带酶切位点的引物扩全基因，插入到适当载体中。。。。。。
                         求大家帮忙了，迷茫中
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1楼 2013-03-14 20:43:48
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thinkerboy

铁虫 (小有名气)
楼主想请教你，你是怎么构建感染性克隆的，我最近也要构建感染性克隆，是鸡传染性贫血病毒，也是圆环病毒科的，但是一点头绪没有，你有什么关于dna病毒感染性克隆的资料文献什么的，或者你的构建圆环感染性克隆的方法步骤能给我借鉴一下么。
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3楼2013-12-26 10:57:47
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Everpower

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-06-17 23:07:29
因为PCV2病毒基因是环状的，所以先用两对基因扩增PCV2，把环变成两个有重叠区域的片段，然后再用带酶切的引物扩增PCV2的全长。假如直接用带酶切位点的PCV2扩增全长的引物扩增PCV2全基因组，因为PCV2是环状的，所以上游引物和下游引物与PCV2的模板结合时引物的一部分碱基不能与模板结合，扩增效率很低。
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2楼2013-06-17 22:07:14
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