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shuoshu110

木虫 (小有名气)

[求助] 关于lc-ms的使用问题。本人菜鸟哈问的比较低级希望大神们帮帮忙

本人用lc-ms测了植物药的粗提物,输入目标物的相对分子质量后得出了一组有峰面积的 峰,我想测的是总生物碱的含量,也就是比较这一组样品中生物碱含量的多少,即我需要把峰面积算成浓度吗?怎么算呢?如果想知道浓度
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decloud

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

你说的一组峰,你是跑的MS呢还是MS/MS,
如果是MS, 跑个标准曲线,换算成浓度就好了
如果是MS/MS,取其中的主要峰,换算成浓度啊。
适则存乙,劳则忙乙,
2楼2013-03-18 05:47:42
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shuoshu110

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by decloud at 2013-03-18 05:47:42
你说的一组峰,你是跑的MS呢还是MS/MS,
如果是MS, 跑个标准曲线,换算成浓度就好了
如果是MS/MS,取其中的主要峰,换算成浓度啊。

我没有 标准品,没法换算成弄刚度啊。而且用液质联用分出来的,只是根据我给出的相对分子质量,得到一些峰和峰面积,知道保留时间,其他的浓度什么的,怎么算呢?还是不能算浓度只能看看相对大小?因为没有标准品。有人说用内标法可以,加个内标物,但是这个内标物该怎么选择呢?
3楼2013-03-19 08:47:34
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decloud

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
shuoshu110: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-20 21:33:25
引用回帖:
3楼: Originally posted by shuoshu110 at 2013-03-18 18:47:34
我没有 标准品,没法换算成弄刚度啊。而且用液质联用分出来的,只是根据我给出的相对分子质量,得到一些峰和峰面积,知道保留时间,其他的浓度什么的,怎么算呢?还是不能算浓度只能看看相对大小?因为没有标准品。 ...

额,你是不是弄混掉了。。。内标的,一个确定的浓度,在标准品和样品里面都要加的,算是换算的一个介质吧。。。

内标一般是选择一个结构,物理性质和你的分析物相似的,但是出峰时间不同的。一般可以从文献里找到,看别人用什么,如果比较不缺钱的话,可以选择同为素 C13什么的,更甚的可以选择C14.。

一般是在所有样品里加上同等浓度的内标IS,然后用    标准品峰/IS峰  得出一个值ratio,再用这个值和标准品的浓度 (已知)做一个标准曲线,

然后你的样品的峰值/IS峰,再带入到标准曲线里得出生物碱的浓度。。。

这样可以防止处理过程中譬如蛋白沉淀,extraction对样品浓度的影响。。。。
适则存乙,劳则忙乙,
4楼2013-03-20 04:26:10
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shuoshu110

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by decloud at 2013-03-20 04:26:10
额,你是不是弄混掉了。。。内标的,一个确定的浓度,在标准品和样品里面都要加的,算是换算的一个介质吧。。。

内标一般是选择一个结构,物理性质和你的分析物相似的,但是出峰时间不同的。一般可以从文献里找 ...

哦哦谢谢
5楼2013-03-20 21:34:04
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