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hylee103

金虫 (正式写手)

[求助] LAMP相关问题求助 已有2人参与

最近在做病毒的lamp检测,原模板浓度为0.2ug/ul,将模板10倍稀释,稀释到10 -21时,还可以检测到,是不是出现假阳性了?该怎么避免假阳性现象呢?求大家多多指导!
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soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党

【答案】应助回帖

引用回帖:
16楼: Originally posted by 晴晴12352 at 2014-08-02 16:28:50
亲,想请教个问题,LAMP老出现假阳性怎么办呢?
...

1. 找个干净的房间or超净台or生物安全柜
2. 未开封的引物和无核酶水,配制引物
3. 未开封的Reaction Mix和Bst酶,RT-LAMP的话还有AMV酶,配制反应体系
4. 做NTC(No Template Control),用无核酶水充当模板,3个一组
5. 等温反应,我一般会把NTC的反应时间设置为120分钟,方便观察是否有非特异反应以及非特异反应的出峰时间
6. 如果非特异反应没有或者出峰时间在60分钟之后,那这套引物有戏;如果非特异出峰很快,那就重新设计引物吧
17楼2014-08-04 21:56:22
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119904386

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
hylee103(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖应助! 2013-04-29 14:01:05
lamp极易假阳性,除了注意操作外,只能换用品、换试剂、换枪、换房间了
2楼2013-03-19 07:53:42
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gengning0427

铜虫 (小有名气)

我是来求助的~~~我的LAMP为什么总也P不出来 去网上找的各种资料 是不是有什么地方不对,LZ可以指教下么?
戒掉安逸 多逼逼自己
3楼2013-04-28 15:27:08
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hylee103

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by gengning0427 at 2013-04-28 15:27:08
我是来求助的~~~我的LAMP为什么总也P不出来 去网上找的各种资料 是不是有什么地方不对,LZ可以指教下么?

你确定你的引物是否好用了吗?
4楼2013-04-29 12:08:27
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