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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » miRNA反转录总是效果很差
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周雨905

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
10楼: Originally posted by machao8405 at 2013-09-18 17:42:52
最好一起，如果两个引物互相没影响的话...

我做9个miRNA的定量，应该怎么设计实验呢，是9个miRNA和内参混在一起反转录吗？还是有数量上的限制。还是所有miRNA和内参都在单独的管子里反转录后在定量呢？
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11楼2015-03-03 10:52:51
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leimengyuan

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 这是马甲 at 2013-09-17 09:17:36
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物，不知道楼主所说的效果很差是什么意思，动物上反转引物的设计有固定的通用序列，再加上几个miRNA特有的碱基即可，我反转了10来个，效果都还不错

请问一下miRNA反转录引物的设计有没有具体的方法？可不可以发给我一份，我做的也是动物的，谢谢！我的邮箱：zyzlr@163.com
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12楼2015-08-06 20:19:55
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Manny-law

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 这是马甲 at 2013-09-17 09:17:36
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物，不知道楼主所说的效果很差是什么意思，动物上反转引物的设计有固定的通用序列，再加上几个miRNA特有的碱基即可，我反转了10来个，效果都还不错

您好，本人现在也做动物miRNA，刚开始做，能把您的方法发给我一份吗 1051192366@qq.com
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13楼2017-02-25 08:53:11
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Sazanami123

铁虫 (初入文坛)
楼主，可否讲一讲加尾法怎么设计引物啊？茎环法一直不成功，也不知道为啥，实验室都没人有经验，全凭自己摸索。。。
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14楼2017-03-06 16:33:28
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中洪小刘

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by Myre-Y0Y0 at 2013-09-18 08:37:52
我的也是动物的、我用的也是茎环引物、可是我的目的条带正常PCR出来就条带很弱、我想知道我的问题出在哪里了、小RNA的反转录和正常的RNA有什么不同么？我的内参却很亮，溶解曲线也很正常。。我快崩溃了。。。...

我们公司可以帮你搞定

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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15楼2017-03-06 22:30:10
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