24小时热门版块排行榜    

查看: 3570  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

[求助] miRNA反转录总是效果很差

miRNA反转录总是效果很差,加尾法试过10条miRNA只有1个引物凑合能用,茎环法14条miRNA只有3条引物能用,试验做不下去了,谁能有效的帮我设计一下引物啊?我的试验材料是小麦。
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by Myre-Y0Y0 at 2013-09-18 10:11:49
还有就是茎环反转录,你和内参是一起反转录的,还是分开转的?...

最好一起,如果两个引物互相没影响的话
10楼2013-09-18 17:42:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

这是马甲

至尊木虫 (著名写手)

谁的马甲都不是

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2013-09-17 16:38:29
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错
这是一只什么都不懂的马甲~~~
2楼2013-09-17 09:17:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

machao8405

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 这是马甲 at 2013-09-17 09:17:36
我做的是动物的~~~
我也是用的茎环结构的反转引物,不知道楼主所说的效果很差是什么意思,动物上反转引物的设计有固定的通用序列,再加上几个miRNA特有的碱基即可,我反转了10来个,效果都还不错

试验已经顺利完成了
3楼2013-09-17 20:53:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Myre-Y0Y0

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by machao8405 at 2013-09-17 20:53:45
试验已经顺利完成了...

卤煮咋做的、我用的茎环引物反转录,可是我的目的条带相当不亮啊、microRNA的反转录和其他的反转录有什么区别么?
4楼2013-09-18 08:33:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见