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小丑的心

银虫 (小有名气)

[求助] 人外周血造血干细胞分离和扩增

最近在做外周血造血干细胞分离扩增,存在以下问题,望各位指导
1、分离方面:目前应用免疫磁珠分离cd34+,人外周血未经动员,所以细胞数量相当少,想请问免疫磁珠分离和流式分选两种方法,在兼顾纯度和细胞数量时如何选择
2、扩增:以前我做的是脐血造血干细胞培养,长的还可以,可是同样培养基养外周血来源的造血干基本不扩增,请问有没有养过的同仁,帮忙看一下
  以往IMDM+血清,SCF、flt-3、il-3、TPO
   最近改用造血干细胞专用无血清培养基仍然扩增不理想
请问培养基和细胞因子选择是否有误,并请帮忙分析可能导致影响细胞扩增的原因
先谢谢各位虫子!
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