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onlycwt

铜虫 (小有名气)

[求助] 金电极表面滴加抗体溶液,冰箱4°过夜发现干了怎么办???

最近在做免疫传感器实验。使用的体系是:金电极-硫醇-抗体-抗原。

     我用的抗体浓度是0.5mg/ml,金电极表面滴加5ul在常温下放置半小时后放置冰箱4°C过夜。第二天我发现电极表面干了(也不是完全干,像一层粘的膜),但是从冰箱拿出来放置在常温中1分钟后表面又会变得湿润了。后续又滴加过20ul抗体溶液,过夜后也干了。
     像这样干了的情况,会不会影响抗体的活性,后续抗原接的上吗?电极表面抗体溶液的体积滴加多少微升比较好啊?一般抗体用什么浓度?可以直接放在常温下过夜吗(我在广州,现在室温23度)?

求助,多谢多谢!!
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莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yanbo1986: 金币+2, 感谢应助。 2013-03-13 14:27:40
onlycwt: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-13 14:28:01
为避免水分的蒸发,你该把样品放置在一个特殊的密封的容器中,容器下面装一些缓冲溶液,上面放置你的样品,然后将容器密封盖好,再放冰箱。
  现在的情况,很难受说蛋白质是否变性没有,不过,也需要试一试,滴加少量缓冲液润湿样品后,假设没有变性进行你的下一步,如果结果不行。就重新开始,过夜保存按上述方式。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
2楼2013-03-13 14:07:57
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onlycwt

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Jackcd12 at 2013-03-13 14:07:57
为避免水分的蒸发,你该把样品放置在一个特殊的密封的容器中,容器下面装一些缓冲溶液,上面放置你的样品,然后将容器密封盖好,再放冰箱。
  现在的情况,很难受说蛋白质是否变性没有,不过,也需要试一试,滴加少 ...

我是放大烧杯中,用保鲜膜密封了的,表面滴加了20uL也干了,但是常温下密闭容器中过夜是不会干的,不知道是不是冻干了
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
3楼2013-03-13 14:27:54
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醋人

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
onlycwt: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-03-13 17:10:00
冰箱4°C冷藏,很有可能蒸发,可以把实验放在小烧杯中,再放入大烧杯,大烧杯添加1cm的水,保鲜膜密封
精专业、强意志、壮身体
4楼2013-03-13 14:47:00
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Jackcd12

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by onlycwt at 2013-03-13 14:27:54
我是放大烧杯中,用保鲜膜密封了的,表面滴加了20uL也干了,但是常温下密闭容器中过夜是不会干的,不知道是不是冻干了...

变干的原因是水分蒸发,样品在有水溶液的密闭中,水的蒸气压相同,这时样品不会变干的。如果需要放置较长时间后再用的话,最好放冰箱。
Themoreamanlearns,themoreheknowshisignorance!
5楼2013-03-13 14:54:33
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onlycwt

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 醋人 at 2013-03-13 14:47:00
冰箱4°C冷藏,很有可能蒸发,可以把实验放在小烧杯中,再放入大烧杯,大烧杯添加1cm的水,保鲜膜密封

我试试看,谢谢谢!另外,抗体在冰箱溶液没有干的情况下放置10小时会不会失活?
莫听穿林打叶声,何妨吟啸且徐行。
6楼2013-03-13 17:10:53
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醋人

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
6楼: Originally posted by onlycwt at 2013-03-13 17:10:53
我试试看,谢谢谢!另外,抗体在冰箱溶液没有干的情况下放置10小时会不会失活?...

这就不清楚了,自己看吧
精专业、强意志、壮身体
7楼2013-03-13 17:15:57
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